Diseño de virus tacaribe recombinante hiperateunado como plataforma vacunal contra la fiebre hemorrágica argentina

GALLO, GIOVANNA; FOSCALDI, SABRINA; SEPÚLVEDA, CLAUDIA; LÓPEZ, NORA

Congreso; XIII Congreso Argentino de Virología. VI Simposio de Virología Clínica. IV Simposio de Virología Veterinaria.; 2021

Sociedad Argentina de Virología

La Fiebre Hemorrágica Argentina (FHA) es una severa enfermedad endemo-epidémica de la pampa argentina, cuyo agente etiológico es el virus Junín (JUNV), miembro de la familia Arenaviridae. Argentina cuenta con una vacuna a virus vivo atenuado, Candid#1, que ha mostrado ser efectiva contra la FHA. Sin embargo, debido a sus características, parte de la población en riesgo queda excluida de la vacunación. Nos propusimos desarrollar un candidato vacunal que permita ampliar la cobertura contra la FHA, a partir de virus Tacaribe (TCRV), un arenavirus no patógeno filogenética y antigénicamente muy cercano a JUNV. Con el fin de introducir marcadores de atenuación adicionales en TCRV, generamos una mutación por transversión en la región regulatoria 5? no codificante (5?NCR) en uno de los segmentos del genoma viral, la cual redujo en un 50% la replicación en un sistema minireplicón. Por otro lado, generamos mutaciones en el sitio activo del dominio exonucleasa de la proteína de la nucleocápside (NP), el cual está involucrado en la supresión de la respuesta de IFN-I celular. Dichas mutaciones no afectaron el nivel de expresión de NP ni su capacidad de asistir a la polimerasa viral durante la replicación del ARN viral, pero impactaron en su habilidad de inhibir la síntesis de IFN-I. Luego, mediante un sistema de genética reversa puesto a punto en el laboratorio, generamos TCRV recombinante (rTCRV) que incluye las mutaciones en la región 5?NCR y en el dominio exonucleasa de NP. El rTCRV mutante mostró placas con morfología y tamaño similares a rTCRV salvaje y un título de 103 PFU/ml. Ensayos posteriores nos permitirán evaluar el grado de atenuación del rTCRV mutante. Estos resultados, además, destacan la relevancia del sistema de genética reversa para el estudio de determinantes de atenuación de TCRV, prototipo de los arenavirus sudamericanos.