Efecto de la hipertermia in vitro sobre la morfometría de folículos pre- antrales de bovinos

CARDONE, DANIELA ALEJANDRA; BOSCH, IGNACIO; SULIÁ, ANGEL SEBASTIÁN; CÁCERES, ANTONELLA ROSARIO RAMONA; SANHUEZA, MARÍA DE LOS ÁNGELES; LACONI, MYRIAM RAQUEL

Mendoza

Congreso; 1º CONGRESO PROVINCIAL INTERUNIVERSITARIO DE I + D + i; 2021

Universidad de Champagnat, Universidad de Mendoza, Universidad Juan Agustin Maza, Universidad Catolica Argentina, Universidad de Congreso, Universidad del Aconcagua, Universidad Tecnologica Nacional

La hipertermia o estrés calórico se produce cuando los mecanismos de disipación de calor seven superados por la producción de calor externo e interno. La reserva ovárica es un factorimportante que contribuye al éxito reproductivo en el ganado bovino y es determinada por elreservorio de folículos pre antrales en especial los primordiales. Se ha reportado que el estréstérmico tiene efectos perjudiciales sobre el desarrollo de los folículos antrales, pero aún sedesconocen en profundidad los factores que afectan a los folículos pre-antrales.El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del estrés calórico sobre los ovarios de bovinosen un diseño in vitro, analizando la morfometría de los folículos pre-antrales. Se aislaronfragmentos de corteza ovárica de vacas Aberdeen Angus y se incubaron los mismos adiferentes temperaturas en baños térmicos. Los grupos experimentales fueron: 1- fragmentossin tratamiento que fueron fijados inmediatamente post extracción para posteriores estudioshistológicos (Control); 2-fragmentos expuestos a normotermia (38,5°C) o estrés calórico (41°C).Ambos grupos fueron incubados por 120 minutos en baños térmicos. Luego de la incubaciónlos explantes fueron fijados en Bouin y preparados para realizar un análisis histomorfométrico.Se tomaron datos del recuento folicular (folículos primordiales, primarios y secundarios), eldiámetro de folículos primordiales y el desarrollo de atresia.El experimento se complementó con el uso de inteligencia artificial para la identificación y elrecuento folicular de forma automatizada cómo parte de una tesis de grado de la carrera deBioingeniería de la Facultad de Ingeniería de la Universidad de Mendoza. El recuento de formaautomatizada se verificó de forma manual cómo parte de validación de la tecnología.El avance en el área de la Inteligencia Artificial, ha facilitado el desarrollo de numerosasaplicaciones, entre ellas la más usada es el reconocimiento de objetos a través de patrones.Por lo tanto, esta tecnología puede aplicarse en laboratorios para la detección de estructurasováricas en una imagen de un corte histológico, obteniendo resultados precisos y rápidos,disminuyendo los tiempos para procesar cada muestra.Los resultados indican que la hipertermia provocó una disminución significativa en el númerode folículos pre-antrales respecto al grupo control y al grupo incubado a 38,5°C (p<0,001). Elrecuento de folículos pre-antrales entre el grupo incubado a 38,5° y el grupo control nodemostró diferencias significativas.El diámetro de los folículos primordiales fue calculado usando el promedio de la mayor longitudy ancho del folículo en micrómetros usando la barra de escala incluida en cada imagen. Eldiámetro de los folículos primordiales fue menor en el grupo sometido a 38,5° respecto alcontrol, con una diferencia de p < 0,01. Además, el diámetro de los folículos del grupo incubadoa 41°C fue significativamente menor al de 38,5°C con un p< 0,005. También se encontró unaumento de la atresia folicular (p<0,05) en la incubación a 41°C con respecto a los demásgrupos. Los resultados de este trabajo indicaron que una breve exposición a altas temperaturasafecta la morfometría de los folículos pre-antrales causando un efecto agudo que dañaría lamorfometría ovárica.2El presente trabajo muestra que la cantidad de los folículos pre-antrales de fragmentos decorteza ovárica se modifica de manera significativa al someterse a estrés calórico. Luego deuna incubación a 41°C se observó una disminución del diámetro de los folículos primordiales.Estudios anteriores demostraron que al cultivar folículos pre-antrales bajo estrés calóricointermitente por 7 días, el diámetro y la viabilidad de los folículos disminuye. A partir de estosresultados, se determinó que los folículos pre-antrales son sensibles al estrés calórico y que susensibilidad aumenta a medida que el folículo se desarrolla, en contraste a lo descrito por otrosautores, donde se indica que el pool ovárico de folículos es resistente al calor.En estudios similares al presente trabajo bajo estrés térmico se encontró una mayor producciónde especies de oxígeno reactivo, una disminución en el diámetro y la viabilidad folicular,además de un aumento de la transcripción de SOD1 (superóxido dismutasa).En cuanto al efecto del estrés térmico sobre la atresia folicular, los resultados en este trabajoindican un aumento de la atresia de los folículos pre-antrales en el grupo sometido a 41°C,evidenciado por un efecto en la morfología de los folículos antes mencionados. Los signos deatresia registrados incluyen fragmentación de los núcleos de los ovocitos, desorganización dela granulosa, picnosis marcada y separación de las células de la granulosa de la membranabasal.Conclusión: los resultados obtenidos permiten evidenciar el efecto negativo de la exposición defragmentos de corteza de ovario a altas temperaturas en un breve período de tiempo causandodisminución del diámetro de los folículos primordiales de fragmentos de corteza ovárica yalteraciones morfológicas compatibles con la atresia. Los resultados obtenidos son de utilidadpara aportar evidencias sobre el efecto de la hipertermia en cultivos in vitro de fragmentos decorteza ovárica ?in situ?.