INVESTIGADORES
PRENDES Luciana Paola
congresos y reuniones científicas
Título:
C/EBPbeta interactúa con Heterochromatin Protein 1alpha en heterocromatina pericentromérica.
Autor/es:
LUCIANA PAOLA PRENDES; GRACIELA PIWIEN PILLIPUK
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)- Reunión de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2008
Institución organizadora:
SAIC (Sociedad Argentina de Investigación Clínica)
Resumen:
En estudios previos demostramos que al inducirse la diferenciación adipocítica de los fibroblastos 3T3-L1, C/EBPb se relocaliza en áreas de heterocromatina pericentromérica y se une a sitios consenso presentes en el ADN satelital. Además, C/EBPb colocaliza con HP1a, factor constitutivo de heterocromatina. Resulta intrigante que un factor de transcripción como C/EBPb se localice en regiones heterocromáticas de baja actividad trascripcional junto con HP-1a, siendo los objetivos del presente estudio comprobar y caracterizar la interacción C/EBPb-HP1a y dilucidar el rol funcional de dicha interacción. Para estudiar la interacción C/EBPb-HP-1a en el ambiente celular, utilizamos Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC), novedosa metodología basada en la complementación de los fragmentos N- y C-terminal de una proteína fluorescente como resultado de la interacción entre las proteínas a las que dichos fragmentos están fusionados, evento que determina la recuperación de fluorescencia. Demostramos que HP1a interactúa con las dos isoformas de C/EBPb LAP y LIP, en áreas de heterocromatina pericentromérica. Además, determinamos que la región básica de unión al ADN de LAP y LIP y que los dominios chromodomain y hinge de HP1a serían los responsables de la interacción entre dichos factores. Empleando siRNA, observamos que en ausencia de C/EBPb no se modifica la distribución subnuclear de HP1a. En cambio, el knock-down de HP1a produce una disgregación de los cromocentros donde se concentra C/EBPb, disminuyendo su fracción nucleoplásmica. Este resultado sugiere que HP-1a podría regular el equilibrio entre las fracciones hetero- y eucromáticas de C/EBPb. En ensayos de gen reportero, la expresión de HP1a disminuye la actividad transcripcional de LAP. En síntesis, LAP y LIP interactúan con HP1a en áreas de heterocromatina y postulamos que C/EBPb podría ?reclutar? a HP1a a genes target produciendo una ?heterocromatinización? local lo que facilitaría el silenciamiento de dicho gen. <!-- @page { margin: 2cm } P { margin-bottom: 0.21cm } -->