Caracterización de nuevos complejos de Anfotericina B con polielectrolitos biocompatibles para el tratamiento de la Leishmaniasis

GARCÍA BUSTOS, MARÍA FERNANDA; AMBROSIONI, FRANCO E.; JIMENEZ-KAIRUZ, ÁLVARO F.

Encuentro; 1er Encuentro Virtual de Caracterización de Materiales - CaracterizAR 2020; 2020

Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco (IQUIMEFA, CONICET-UBA)

La condensación iónica entre polielectrolitos y fármacos (PE-F) de cargas opuestas ofrece numerosas ventajas como sistemas farmacoterapéuticos, tales como, capacidad de actuar como un reservorio y de esta forma lograr una liberación modificada (pH/fuerza iónica dependiente), aumento de la compatibilidad acuosa de fármacos poco solubles y aumento de la estabilidad química y frente al ataque enzimático, como así también del tiempo de contacto sobre la superficie de absorción (bioadhesión), lo que en general se traduce finalmente en una mayor biodisponibilidad y seguridad del sistema. Además, la versatilidad posológica y flexibilidad de formulación ofrecen interesantes alternativas que amplían su campo de aplicación para diferentes vías de administración. El presente trabajo se focaliza en la caracterización fisicoquímica y evaluación de nuevos complejos entre Anfotericina B (AFB) y dos polielectrolitos naturales biocompatibles y bioadhesivos, uno aniónico ácido hialurónico (HA) y otro catiónico Chitosan (CHI) ampliamente utilizados y reconocidos como seguros para su uso en medicina humana y veterinaria.Se seleccionó AFB, como F modelo, debido a que es una molécula anfótera de interés en el tratamiento de la Leishmaniasis, una enfermedad parasitaria endémica en nuestro país, considerada una enfermedad desatendida ya que actualmente no cuenta con un tratamiento seguro y costo-efectivo. Los estados de agregación de AFB, parámetro complejo que condiciona tanto la actividad, farmacocinética como la toxicidad de AFB, fueron estudiados mediante los espectros de absorción UV-Vis, picos máximos de absorbancia relativa y sus correspondientes coeficientes de extinción molar (ε) y en diversas condiciones ([AFB], temperatura, solvente). La obtención de HA fue a partir de la neutralización de Hialuronato de Sodio en columnas de intercambio iónico. Sobre una dispersión acuosa de los PE y bajo agitación mecánica, se incorporó diferentes proporciones de AFB disuelta en DMSO para generar los complejos (HA-AFBx) y (CHI-AFBx). El subíndice ?x? se corresponde con él % de grupos ionizables del PE neutralizados con AFB (25 y 50%). Para obtener el material sólido, las muestras fueron dializadas para eliminar el exceso de DMSO, congeladas y liofilizadas. La caracterización tanto de AFB, complejos PE-AFB como mezclas físicas fue realizada en dispersión como del estado sólido, mediante determinaciones ácido-base (pH y PDB), espectroscopia FTIR y UV-Vis, difracción de rayos X de polvos, microscopia óptica, análisis térmico (TGA, DSC). Se evaluó la compatibilidad de AB en presencia de HA y CHI, Además, se realizó una evaluación preliminar y comparativa de la actividad in-vitro de los complejos compuestos sobre Promastigotes de Leishmania Amazonensis en cultivos celulares. La caracterización de AFB corroboró su grado de pureza y forma cristalina. Se observó el predominio de la forma monomérica en DMSO y agregada en agua. Los equivalentes de grupos ionizables fueron 2,35 y 1,3 mmol/g para HA y CHI, respectivamente. Los materiales en estado sólido, muestran evidencias de interacción iónica entre AFB y los PE (FTIR), se caracterizan por presentar un estado amorfo, con un contenido de agua ≤10%, térmicamente estables y aparente interacción completa de AFB con los PE (sin AFB libre). Además, se observó un aumento de compatibilidad acuosa de AFB por la formación de complejos (PE-AFBx) La actividad in vitro de AFB formando complejos fue similar a la del fármaco puro en idénticas condiciones. Los estudios preliminares de nuevos complejos de AFB con HA y CHI han mostrado propiedades fisicoquímicas mejoradas respecto a AFB pura y optima actividad antiparasitaria in vitro, lo que constituye una interesante alternativa para el desarrollo de sistemas farmacoterapéuticos más eficaces y seguros para el tratamiento de la Leishmaniasis cutánea.