EVALUACIÓN DE LA TOXICIDAD DE BENZNIDAZOL Y NIFURTIMOX: EFECTOS SOBRE LA MADURACIÓN IN VITRO DE OVOCITOS BOVINOS

MARURI, A.; GULÍN, E.; MENDIZABAL, I.; LOMBARDO, DM.

CABA

Jornada; X JORNADAS DE JÓVENES INVESTIGADORES; 2021

Secretaría de Ciencia y Técnica FVET-UBA

Las opciones terapéuticas para el tratamiento de la enfermedad de Chagas se limitan anifurtimox (NFX) y benznidazol (BZ). Dada la escasa información de potenciales efectossobre las gametas y el desarrollo embrionario, no se recomienda el tratamiento etiológicoen mujeres durante la gestación. La generación de información preclínica podríacontribuir al análisis costo-beneficio para estudios clínicos posteriores tendientes aestablecer la seguridad del tratamiento durante la gestación, asegurando el tratamiento dela mujer embarazada durante los controles médicos periódicos y previniendo incluso latransmisión congénita de la enfermedad. Como primer paso, se estudió la toxicidad invitro sobre la maduración de ovocitos obtenidos por punción-aspiración de ovariosprovenientes de bovinos de faena. Se seleccionaron ovocitos con citoplasma homogéneorodeados por un cumulus compacto de al menos tres capas celulares. Posteriormente, selos incubó a 39 °C en atmósfera con 5% CO2, en presencia de concentracionesdecrecientes de NFX, BZ (500-2 μM) o con el vehículo (NT) a la máxima concentraciónde trabajo (DMSO; ≤ 0,081%). Luego de 22 h, se evaluó la viabilidad con azul tripán yel porcentaje de maduración nuclear ovocitaria con tinción de Hoechst 33342,considerando maduros aquellos ovocitos que alcanzaron el estadio de metafase II. A partirdel análisis de los resultados de tres réplicas independientes, el grupo NT presentó unaviabilidad del 100% y una maduración nuclear del 81%, mientras que la maduración fueafectada de manera dependiente de la concentración, obteniendo valores de concentracióninhibitoria del 50% de la maduración (IC50) de 222 y 163 μM, para BZ y NFXrespectivamente. La viabilidad de los ovocitos en el grupo NT y a distintasconcentraciones de BZ fue de 91 a 100%, mientras que para NFX osciló entre 69 y 79%.Los valores de IC50 para BZ y NFX obtenidos se encuentran por sobre el límitepreviamente establecido en la validación del ensayo de la concentración potencialmentetóxica para los ovocitos (≤ 50 μM) e indicarían que tanto NFX como BZ no afectan demanera significativa la maduración in vitro de ovocitos bovinos. Deberá continuarse conestudios en espermatozoides y estadios tempranos y tardíos del desarrollo embrionariopara establecer una completa evaluación del potencial efecto toxicológico de BZ y NFXsobre la función reproductiva.