DIFERENCIAS ENTRE EL ADN VIRAL CROMOSÓMICO Y EXTRA-CROMOSÓMICO EN UNA SUPERINFECCIÓN IN VITRO CON HIV-1.

MARQUINA S.,; GALVÁN V.,; GÓMEZ CARRILLO M.,; FERNÁNDEZ D.; LIBONATTI O.,; RABINOVICH R.

TANDIL, Pcia de Buenos Aires

Congreso; V CONGRESO ARGENTINO DE VIROLOGÍA, II ENCUENTRO DE VIRÓLOGOS LATINOAMERICANOS; 1996

Sociedad Argentina de Virología

Una de las características de la replicación del HIV-1. como de otros lentivirus. es que durante la misma se acumula ADN viral extracromosómico tanto in vivo como ¡n vitro. Se ha propuesto, aunque no hay pruebas directas, que este ADN extracromosómico se origina a partir de la reinfección. Hay experimentos que muestran en lineas linfoides que una variante viral incapaz de integrarse produce antlgeno viral sin poder replicar. Tampoco se sabe si el ADN extracromosóniico contribuye a la vanabíidad genómica o antigénica. En este trabajo se presenta un sistema de reinfección en el cual la variante superinfectante es diferenciable de la presente inicialmente mediante el uso de enzimas de restricción. Células de la linea H9-HTLVIIIB (persistentemente infectadas con HTLVIIIB) fueron reinfectadas con la cepa HIVMN. Para disminuir la autosuperinfección. cuando fue necesaria, la centrifugación se efectué a 4C. Las fracciones de AON cromosámico y extracrornosómico fueron separadas por el método de Hii’t. Se amplificó de cada una de Ias el fragmento C2V3 de la gpl2O del gen env mediante PCR. Los productos de la amplificación fueron digeridos con las enzimas MnIl y BsaJl. Se pudo determinar el predominio de ADN correspondiente a l cepa reinfectante en la fracción extracromosómica a las 48 hs de la supennfección. Esta es una evidencia directa de que el ADN extracromosómico puede er originado por la reinfección. Este resultado es importante ya que se ha reportado que durante la infección con HIV-1 existe una gran producción viral lo que hace a la reinfección más probable. Este hecho y la variabilidad del virus dentro de un mismo individuo, hacen importante estudiar las consecuencias de que las distintas fracciones de ADN contengan diferentes secuencias.