INVESTIGADORES
ADAMO Hugo Pedro
congresos y reuniones científicas
Título:
Activacion de la pNPPasa del transportador de Ca2+ de membrana plasmática por Ca2+ y ATP.
Autor/es:
RINALDI DEBORA EUGENIA; ADAMO HUGO PEDRO
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Encuentro; XL Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Biofisica; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biofisica
Resumen:
Activacion de la pNPPasa del transportador de
Ca2+ de membrana plasmática por Ca2+ y ATP.
El transportador de
Ca2+ de membranas plasmáticas humanas (PMCA), es una P-ATPasa autoinhibida que puede activarse por Ca-calmodulina,
lípidos acidos o proteólisis parcial. Al igual que otras ATPasas de tipo P, la
PMCA puede hidrolizar ésteres fosfóricos no nucleotídicos como el
p-nitrofenilfosfato. Esta actividad fosfatasa ha sido asociada con la conformación E2 de la enzima, en
ausencia de Ca2+. De acuerdo con esta idea hemos mostrado recientemente que la
actividad pNPPasa de la PMCA
purificada de glóbulos rojos de cerdo es máxima en ausencia de Ca2+, y que el Ca2+
inhibe la act pnppasa a traves de la estabilización del confórmero E1 de la misma. Estudios
previos han mostrado que el ATP puede rescatar a la enzima de la inhibición por
Ca2+ forzando a la enzima a ciclar y alcanzar un nuevo estado estacionario en
una conformación tipo E2. Hemos medido la actividad pnppasa a altas
concentraciones de ATP (3 mM)
en función de la concentración de Ca2+. Cuando la enzima fue solubilizada en presencia de fosfatidilcolina (PC)
la pNPPasa en ausencia de Ca2+ fue muy
baja y aumentó con el incremento de las concentraciones de Ca2+. Sin embargo,
si la enzima es solubilizada con lípidos ácidos la pNPPasa en ausencia de Ca2+ fue mayor que con PC y permaneció constante
hasta aproximadamente 1 uM Ca2+ para
luego decaer a concentraciones de Ca2+ mas altas. Por otro lado, hemos observado que cuando la
enzima solubilizada en PC es activada por proteólisis parcial, la
pNPPasa en ausencia de Ca2+ se incremento 2.6 veces y mostro
una dependencia con la concentración de Ca2+ similar a la observada en
presencia de lípidos ácidos. Estos resultados sugieren que el aumento de
pNPPasa de la enzima solubilizada con PC observado a concentraciones crecientes
de Ca+ está relacionado con la perdida
de la capacidad autoinhibidora del segmento C-terminal.
