EFECTO DE IL-1 BETA; EN LA REGULACIÓN DE LA ACTIVIDAD MITOCONDRIAL EN FIBROSIS QUÍSTICA

CLAUZURE, M.; VALDIVIESO, A.G.; S¡§¢NCHEZ, F.; TAMINELLI, G.L.; PAGANO, E.S.; MASSIP COPIZ, M.M.; SCHULMAN, G.; TEIBER, M.L.; SANTA COLOMA, T.A.

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

La Fibrosis Quística (FQ) es una enfermedad autosómica recesiva producida por mutaciones en el gen CFTR (canal transportador de Cl-). Mediante estudios realizados en nuestro laboratorio sabemos que en FQ existe una falla en la actividad del Complejo I mitocondrial (mCx-I). A partir de estos resultados y conociendo la elevada concentración de interleuquina 1 beta (IL-1 beta) en esputo de pacientes FQ, nos interesó estudiar un posible rol de esta citoquina en la disminución de la actividad del mCx-I. En primer lugar se estudió la expresión del ARNm de IL-1 beta. Se emplearon dos modelos de FQ: células IB3-1 (mutación DF508 que afecta el transporte de Cl-) y S9 (IB3-1 corregidas mediante un vector viral que expresa CFTR wt) y células CaCo2, que expresan CFTR wt y CaCo2 tratadas con dos inhibidores del transporte de Cl-, CFTR(inh)-172 y GlyH-101. Se observó un aumento en la expresión del ARNm de la citoquina en las células FQ con respecto a las controles. Por otro lado, se determinó el efecto de IL-1 beta en la actividad mitocondrial. Se incubaron células IB3-1 y S9 con distintas concentraciones de IL-1 beta. Al mismo tiempo, se trataron con un coctel estimulador de la actividad del CFTR. Luego de 24 horas se aislaron mitocondrias y se midió la actividad del mCx-I mediante la técnica de "Blue Native Gels". En ambos casos, al estimular con IL-1 beta a bajas dosis, se observó una disminución de la actividad del mCx-I de hasta ~60%. Llamativamente, en IB3-1 se observó una recuperación total de la actividad del mCx-I a la concentración de IL-1 beta más alta (de 5.0 ng/ml, que es inhibitoria de la expresión del ARNm del CFTR). Podemos concluir que IL-1 beta modifica la actividad de mCx-I de manera diferente en células normales y en células con la actividad del CFTR afectada. Nuestro objetivo es ahora estudiar el mecanismo involucrado en la regulación de la actividad del mCx-I por IL-1 beta. Agradecimientos: Subsidios CONICET(PIP 2009-2011), ANPCYT(PICT-2007,0628) y UCA. Becas CONICET (AGV y MMMC) y ANPCYT(MC).