Regulación de la tirosina quinasa c-Src mediante la actividad del canal de cloruro CFTR

MASSIP COPIZ, M.M.; VALDIVIESO, A.G.; SÁNCHEZ, F.; TAMINELLI, G.L.; PAGANO, E.S.; CLAUZURE, M.; SCHULMAN, G.; TEIBER, M.L.; SANTA COLOMA, T.A .

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

La Fibrosis Quística (FQ) es una enfermedad autosómica recesiva causada por mutaciones en el canal de cloruro CFTR. Previamente encontramos que la expresión y activación de c-Src estaba aumentada en células FQ (J Biol Chem 277:17239, 2002). Otros autores observaron que el epitelio FQ muestra una mayor proliferación que el normal y que las células proliferativas tienen una mayor expresión de receptor de EGF, que activa c-Src. Nuestra hipótesis es que la vía del EGFR podría estar involucrada en la señalización CFTR c-Src. Los objetivos de este trabajo fueron determinar si en diferentes modelos celulares se puede corroborar un aumento de la actividad de c-Src y determinar un posible rol de la vía EGFR en el mecanismo de transducción de señales CFTR Src. Incubando células HT29 (CFTR wt), con los inhibidores del CFTR glibenclamida, CFTR(inh)-172 y GlyH-101, se observó que la actividad de c-Src es mayor en las células con el CFTR inhibido. Debido a posibles efectos inespecíficos de estos inhibidores, se corroboraron los resultados transfectando células CaCo2, que expresan CFTR wt, con 4 ARNs de interferencia. Los ARNi inhibieron la expresión del CFTR en diferente grado. Mediante WB se comprobó que la actividad de c-Src era mayor en las líneas celulares transfectadas que mostraban mayor inhibición del CFTR. Asimismo, se están estudiando los posibles mecanismos involucrados en la señalización CFTR-Src, que incluyen al receptor de EGF (EGFR) y sus ligandos. Se observaron cambios en los niveles de ARN mensajero de EGFR en células CaCo2 (CFTR wt) y CaCo2 tratadas con inhibidores En conclusión, la inhibición de la actividad o expresión del CFTR produce un incremento en la actividad de c-Src y podría estar involucrada la vía del receptor de EGF en la señalización CFTRcSrc. Agradecimientos: Subsidios del CONICET (PIP 2009-2011), ANPCYT (PICT-2007, 0628) y UCA. Becas CONICET (AGV y MMMC) y ANPCYT (MC).