La reducción de la actividad del Complejo I mitocondrial en FQ lleva a un aumento en la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS).

VALDIVIESO, A.G.; SANTA COLOMA, T.A.

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

La Fibrosis Quística (FQ) es la enfermedad autosómica recesiva más común, producida por mutaciones en el canal de Cl- CFTR. En estudios previos demostramos la regulación negativa del ARN mensajero del gen mitocondrial MTND4 en FQ. Este gen codifica la subunidad MTND4 del Complejo I mitocondrial (CIm), un componente fundamental para su actividad. Mediante la medición de la actividad del CIm por la técnica de Blue Native-PAGE confirmamos que la misma se encontraba significativamente reducida en mitocondrias aisladas a partir de distintos modelos celulares para FQ. Debido a que las fallas en la actividad del CIm pueden conducir a una alteración en la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) intracelular, decidimos probar si esto también ocurría en FQ. Con este fin utilizamos como modelo células Caco-2, provenientes de carcinoma de colon, tratadas con inhibidores farmacológicos de la actividad del CFTR (glibenclamida y CFTR(inh)-172) para imitar la condición FQ. La medición de ROS intracelular fue medida por espectrofluorometría utilizando la sonda fluorescente DA-DCFH. La medición de ROS fue realizada a distintos tiempos de inhibición del CFTR para determinar, en caso de que existiese alguna alteración, si esta ocurría antes o después de la disminución de la actividad del CIm. En resultados preliminares observamos un aumento significativo en la producción de ROS a las 48 hs, tiempo en el que ocurre una disminución en la actividad del CIm. Estos resultados sugieren que el aumento en la producción de ROS podría deberse a la disminución en la actividad CIm en FQ, provocada por la reducción de la expresión del gen MTND4. La inducción del aumento en ROS en FQ podría explicar, al menos en parte, algunos de los síntomas característicos de esta enfermedad. Agradecimientos: subsidios ANPCyT (PICT 2007-00628), CONICET (PIP 11220080102551), UCA y beca posdoctoral del CONICET (AGV).