LA MODULACIÓN DE LA AUTOFAGIA CONDICIONA AL VIRUS LINFOTRÓPICO T HUMANO TIPO 1 (HTLV-1)

DUCASA, N ; BENENCIO, P; GARCÍA, MN; GRASSO, D; BIGLIONE, MM ; BERINI, CA

Encuentro; XXXIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Virología; 2019

IntroducciónLa autofagia es un mecanismo catabólico conservado en eucariotas y esencial para el mantenimiento de la homeostasis celular. En los últimos tiempos se ha observado como los virus manipulan el flujo autofágico para facilitar la progresión de la infección viral. Por este motivo, se estudian diferentes inhibidores de la vía autofágica como potenciales blancos terapéuticos. ObjetivoEl objetivo de este estudio fue describir como la infección por el HTLV-1 se condiciona por estado autofágico. Se evaluó como la proteína viral Tax se distribuye según la inducción e inhibición del flujo autofágico. Metodología Se infectó la línea celular HeLa con HTLV-1 por la técnica de co-cultivo con la línea celular MT2 persistentemente infectada por el virus. Se determinó la infección por Western Blot y la eficiencia de infección por citometría de flujo. Por medio de inmunofluorescencia indirecta y microscopía confocal se analizó la proteína viral Tax y el marcador de autofagia LC3 en las células HeLa infectadas. Además, se realizaron tratamientos de inducción e inhibición del flujo autofágico para determinar cómo se condiciona la infección viral. A partir de los resultados hallados resultó interesante ver el comportamiento de Tax y LC3 en líneas linfoides como MT2, persistentemente infectada por HTLV-1 y en la línea celular Jurkat infectadas por el virus. Resultados Se observó como la modulación de la vía autofágica por diferentes tratamientos provoca cambios significativos en el comportamiento de Tax. Bajo un tratamiento de inducción de autofagia se evidenció un incremento en el tamaño promedio de los dominios positivos de Tax. Al utilizar inhibidores del flujo autofágico se observó un aumento significativo en el número de dominios fluorescentes de Tax. Esto confirma que el comportamiento de Tax es condicionado por el estado de autofagia. Además, se observó cómo Tax se ubica en muchos casos asociado a membrana plasmática y en estructuras esféricas, las cuáles se observaron al hacer una reconstrucción 3D a partir planos Z por microscopía confocal. Conclusiones Se observó que la autofagia condiciona la distribución de la proteína Tax de HTLV-1, evidenciándose una localización puntual en dominios de estructuras esféricas en el citoplasma celular y en la membrana plasmática celular.