CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

La germinación de las semillas implica el reinicio del crecimiento del eje embrional, con actividad expansiva y sin división celular definiendo la protrusión radicular. Los ejes aislados de semillas de soja (E) [Glycine max (L. Merr)] comienzan a alargarse a partir de las 10 h, completando la germinación a las 12 h de incubación en agua. En trabajos previos identificamos 2677 proteínas de E incubados 12 h, mostrando extensiva activación de mecanismos de señalización, comunicación y transducción de señales que estarían afectando la expresión génica y gatillando el desarrollo y establecimiento de estructuras anatómicas. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el perfil protéico de E previo a la visualización de la germinación. Los E se incubaron 9 h en agua a 27 ± 1 ºC y oscuridad. Luego, 1 g de E se pulverizó en N2 líquido y se sometió a un protocolo de purificación de proteínas en buffer 5 mM NaAc pH 4,6; conteniendo gradientes (0,4 ? 1) M de sacarosa, seguido de extracción secuencial en 0,2 M CaCl2, 2 M LiCl y buffer úrea (7 M Úrea, 2 M Tioúrea, 4 % CHAPS y 1 %DTT) y precipitación final en TCA 100 %. La identificación de proteínas se realizó por Espectrometría de masa (CEQUIBIEM) utilizando bases de datos públicas (Uniprot y Phytozome). Para los sucesivos extractos se identificaron, respectivamente, 40, 106 y 953 proteínas únicas de soja con al menos dos péptidos de alta confianza. La clasificación por ontología génica (AgriGO) para las proteínas ortólogas de Arabidopsis thaliana mostró un enriquecimiento en proteínas asociadas a procesos de traducción y expresión génica, catabolismo y obtención de energía, finalización del desarrollo y dormición embrionaria. Estos resultados evidenciaron una gran actividad celular vinculada a los eventos tempranos que definen germinación de los Ejes aislados de soja.