Obtención y caracterización de derivados de eritropoyetina humana recombinante con superior actividad antiapoptótica en células PC-12

MÓNICA MATTIO; NATALIA CEAGLIO; NORMA PEROTTI; MARCOS OGGERO; RICARDO KRATJE

Rosario. Santa Fe. Argentina

Congreso; II Congreso Internacional REDBIO–Argentina: La Biotecnología y los Futuros Escenarios Mundiales; 2009

Fundación REDBIO Internacional; NR; ANPCYT; CONICET, INTA; INTI, FAO; FAB

La eritropoyetina (EPO) es una hormona glicoproteica que estimula la proliferación de glóbulos rojos en la médula ósea, por lo que históricamente se ha utilizado para el tratamiento de pacientes con anemia derivada de insuficiencia renal crónica. Sin embargo, últimamente se ha demostrado un rol antiapoptótico y neuroprotector de la hormona en modelos de daño neuronal in vivo. No obstante, en el tratamiento de dichas patologías la actividad eritropoyética de la EPO puede conllevar a la aparición de efectos colaterales.En el presente trabajo se describe la obtención y caracterización de una combinación de glicoisoformas de eritropoyetina con menor contenido de ácido siálico (6,93 moles de ácido siálico por mol de proteína en comparación con 11,73 correspondientes a la molécula hematopoyética, determinado mediante el método del peryodato-resorcinol), lo que se tradujo en una menor actividad eritropoyética in vivo, evaluada por recuento de reticulocitos en ratones normocitémicos. Dicha hormona, denominada neuroepoetin (rhNPO), fue obtenida mediante purificación adicional de la rhEPO producida en células CHO, presentando una composición de isoformas de carácter más básico con respecto a las exhibidas por la hormona eritropoyética en ensayos de isoelectroenfoque (rango de pI 4,2-6,1). Por otra parte, ensayos preliminares utilizando células PC-12 sometidas a muerte por privación de suero y de factor de crecimiento nervioso demostraron una mayor capacidad antiapoptótica de la rhNPO con respecto a la rhEPO, evidenciada mediante técnica de TUNEL. Estos resultados estimulan el estudio de la neuroepoetin como una droga potencial para el tratamiento de enfermedades del sistema nervioso.