Muteínas glicosiladas de rhIFN-alfa2b con propiedades farmacocinéticas mejoradas

NATALIA CEAGLIO; MARCOS OGGERO; MARINA ETCHEVERRIGARAY; RICARDO KRATJE

Buenos Aires. Argentina

Congreso; Biolatina 2006 - VII Feria-Congreso Latinoamericano de Biotecnología y III Congreso Argentino de Biotecnología; 2006

Foro Argentino de Biotecnología

El IFN-alfa humano es una familia de proteínas relacionadas con actividad antiviral, antiproliferativa e inmunomoduladora. La formulación farmacéutica no glicosilada de IFN-alfa humano recombinante se emplea actualmente para el tratamiento de infecciones virales y diversas patologías tumorales. La baja actividad biológica in vivo de dicha molécula, que se atribuye principalmente a su rápido clearance plasmático, determina el empleo de dosis elevadas y frecuentes, generando la aparición de efectos colaterales indeseados. En este trabajo, se propone la introducción de sitios potenciales de N-glicosilación en la molécula de hIFN-alfa2b, con el fin de aumentar la actividad biológica in vivo de la proteína, disminuyendo la frecuencia y las dosis aplicadas. Para tal fin, se construyeron 14 muteínas con un sitio de N-glicosilación, las cuales fueron clonadas en plásmidos de expresión para células eucariotas que se utilizaron para transfectar células CHO. La actividad específica y el grado de N-glicosilación de las muteínas presentes en los sobrenadantes de cultivo fueron variables de acuerdo con el sitio de la mutación. Una de ellas fue evaluada mediante ensayos de farmacocinética en animales, obteniéndose un área bajo la curva 1,3 veces superior a la correspondiente al rhIFN-alfa2b no glicosilado. A partir de esta muteína, que exhibió propiedades farmacocinéticas mejoradas, se incorporarán nuevos sitios de N-glicosilación con el fin de obtener una molécula con mayor actividad biológica in vivo.