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Zephyranthes filifolia es una especie geófita nativa de la región semiárida argentina de potencial valor ornamental y útil para el fitomejoramiento del género. El establecimiento de un protocolo de bulbificación in vitro representa una ventaja para un esquema de micropropagación eficiente, ya que provee órganos naturalmente rústicos para el cultivo ex vitro. El objetivo del presente ensayo fue estudiar el efecto de la concentración de sacarosa y AIA sobre la diferenciación de bulbillos a partir microvástagos de Zephyranthes filifolia. Se cultivaron microvástagos durante 120 días en medio con sales y vitaminas MS solo o suplementado con sacarosa en concentraciones variables (30, 60, 90 y 120 g L-1) con o sin el agregado de 1 mg L-1 de AIA. El crecimiento de los bulbillos fue significativamente estimulado por el aumento en la concentración de sacarosa hasta 90 g L-1; una concentración mayor afectó la bulbificación. El agregado de 1 mg L-1 de AIA mejoró el crecimiento, lográndose los mayores bulbillos con concentraciones de sacarosa entre 60 y 90 g L-1 (peso fresco 1,3-1,4 g, diámetro 5,9-6 mm). Los mayores índices de bulbificación (diámetro ecuatorial/diámetro del cuello) se obtuvieron con las tres concentraciones mayores de sacarosa, con o sin AIA (entre 1,7 y 1,9). Los microbulbos cultivados ex vitro produjeron plántulas normales en invernáculo con brotación entre 7 y 21 días. A los 12 meses de cultivo se obtuvieron plantas floríferas, lo que evidencia un acortamiento en el inicio de la floración natural de la especie. Un mg L-1 AIA y 60 o 90 g L-1 de sacarosa fueron las combinaciones más eficientes para obtener microbulbos de Z. filifolia.