ESTUDIOS EXPLORATORIOS DE TOXICIDAD ACUMULATIVA DE INSECTICIDAS EN CELULAS C6 DE GLIOMA DE RATA

ROMERO, D.M; KOTLER, M.L; WOLANSKY, M.J.

Tandil, Provincia de Buenos Aires

Congreso; Congreso Argentino de Toxicologia; 2011

Asociación Toxicológica Argentina

Niveles bajos de residuos de insecticidas organofosforados (OFs) y piretroides (PIRs) co-ocurren en el ambiente y los alimentos. Considerando cada compuesto por separado, esta contaminación es, en general, inocua para los humanos. Sin embargo, existe consenso sobre la necesidad de generar y considerar datos de neurotoxicidad conjunta de mezclas plaguicidas para mejorar la exactitud de las estimaciones de riesgo para la salud en condiciones realistas de exposición. Nuestro grupo utiliza células C6 de glioma de rata como modelo in vitro con el objetivo de identificar mezclas toxicológicamente relevantes de PIRs y OFs. Para ello, 4 OFs (clorpirifos, acefato, metidation, diazinon) y 4 PIRs (bifentrina, teflutrina, α-cipermetrina, deltametrina) se examinaron luego de 4-48 hs de exposición (0,1-250 μM). Se estimó la dosis umbral para la disminución de la viabilidad celular mediante microscopía óptica y ensayos de MTT. En general, concentraciones del rango μM produjeron caída significativa de la viabilidad a 24-48 hs. CE15 (t=24 hs): 5-100 μM para PIRs; 5-30 μM para OFs. Se evaluaron también los efectos sobre la morfología nuclear utilizando tinción con Hoechst 33258, lo cual evidenció la presencia de anomalías (ej: blebs, micronúcleos). Además, se analizó la relación entre la actividad de enzimas mitocondriales (test MTT) y la morfología mitocondrial (tinción con Mitotracker-Red). Se encontró fragmentación de dichas organelas, aun a concentraciones menores a las efectivas en ensayos de MTT. Por último, se analizó una mezcla de concentraciones equitóxicas de 4 PIRs (1X = Σ CE15) utilizando el ensayo de MTT. Esta mezcla produjo a t24hs una aparente aditividad de efectos al usar la concentración 1X, y aditividad de dosis al examinar una mezcla 0.1X. De este modo, la línea C6 y el estudio de mezclas de dosis bajas resultó útil para identificar rangos de concentraciones sub-µM que generan citotoxicidad, lo cual no hubiera sido detectado si se estudiaba sólo compuestos individuales.