Participación de la autofagia en la tolerancia isquémica inducida por el precondicionamiento isquémico retiniano

BORDONE, MP; CHIANELLI, MS; ROSENSTEIN, RE

Buenos Aires

Congreso; VI Congreso de la Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO; 2009

PARTICIPACION DE LA AUTOFAGIA EN LA TOLERANCIA ISQUÉMICA INDUCIDA POR EL PRECONDICIONAMIENTO ISQUEMICO RETINIANO. Bordone MP, Chianelli M, Rosenstein R Laboratorio de Neuroquímica Retiniana y Oftalmología Experimental, Departamento de Bioquímica Humana, Facultad de Medicina, UBA, CEFyBO-CONICET.melina_bordone@yahoo.com Introducción: La isquemia retiniana es un componente central de diversas enfermedades oculares que pueden producir ceguera. La isquemia se desarrolla cuando el flujo sanguíneo es insuficiente para suplir los requerimientos metabólicos de la retina, uno de los órganos con mayor consumo de oxígeno. Aunque no se dispone de estrategias eficaces para su tratamiento, se ha demostrado la efectividad de la activación de un mecanismo endógeno de protección contra el daño isquémico a través del precondicionamiento isquémico (PCI). El PCI consiste en un breve insulto isquémico inocuo per se que se aplica en forma previa a una isquemia prolongada y deletérea. Recientemente, se ha demostrado que el IPC retiniano correlaciona con la expresión a nivel transcripcional de un gen marcador de autofagia (Apg3). La autofagia es un proceso que involucra la autodegradación de material celular dañado, que ha sido asociada tanto a mecanismos de protección como de daño celular. Objetivo: Evaluar la participación de la autofagia en la tolerancia isquémica inducida por PCI en la retina. Métodos: La isquemia (Isq) se indujo por aumento de la presión intraocular a 120 mm Hg durante 40 min, y el PCI por la aplicación de una isquemia de 5 min, 24 h antes de la isquemia prolongada. A las 24h de la isquemia se determinaron por Western blot los niveles proteicos de beclina 1 (marcador de autofagia) y bax (marcador de apoptosis) y a los 14 días de la isquemia se analizó la función (por electrorretinografía) y la histología retinianas. Se utilizaron 4 grupos experimentales: control, PCI, Isq y PCI + Isq. Resultados: La isquemia disminuyó la amplitud de las ondas a y b del electrorretinograma (p< 0.01 vs. control) y provocó alteraciones histológicas, ambos efectos fueron revertidos por PCI (p< 0.01 vs. isquemia). A las 24 h de la Isq los niveles proteicos de beclina 1 aumentaron significativamente sólo en el grupo PCI + Isq, en tanto que los niveles de bax no difirieron entre los grupos Isq y PCI + Isq, aunque fueron mayores que en los grupos control y PCI. La administración intravítrea de un inhibidor de autofagia (wortmanina) bloqueó la protección funcional e histológica del PCI (p< 0.01 vs. vehículo + PCI + Isq). Conclusiones: Estos resultados sugieren la participación de la autofagia, pero no de la apoptosis, como parte de los mecanismos de protección frente al daño isquémico retiniano inducida por PCI.