INVESTIGADORES
DE BREUIL Soledad
congresos y reuniones científicas
Título:
Detección de partículas virales asociadas al achaparramiento de la alfalfa
Autor/es:
TRUCCO, V.M.; NOME, C.F.; BEJERMAN, N.; DE BREUIL, S.; LENARDON, S.; GIOLITTI, F.
Lugar:
La Falda
Reunión:
Congreso; 5° Congreso Argentino de Microscopía; 2018
Institución organizadora:
SAMIC
Resumen:
En Argentina, la alfalfa es el tercer cultivo más extensamente sembrado y el forrajero de mayor importancia. En el año 2010, se detectó una enfermedad que causa disminución del tamaño y amarillamiento de planta, y severa deformación de folíolos (arrugamiento, epinastía y enaciones de distintos tamaños), denominada achaparramiento de la alfalfa. En muestras enfermas se detectaron, posteriormente, cinco virus: Alfalfa mosaic virus (AMV), Alfalfa dwarf cytorhabdovirus (ADV), Alfalfa enamovirus-1 (AEV-1), Alfalfa leaf curl virus (ALCV) y Bean leafroll virus (BLRV). Los objetivos de este trabajo fueron determinar el tipo de partículas virales presentes en tejido infectado y localizar celularmente las partículas del ADV, mediante microscopía electrónica de transmisión (MET). Se realizaron preparaciones dip desde un enriquecimiento viral obtenido por ultracentrifugación del homogeneizado de tejido vegetal enfermo; preparaciones serológicamente específicas (ISEM: Immuno Sorbent Electron Microscopy) sensibilizando las rejillas con antisuero específico al BLRV, previo a la etapa de incubación con gotas del extracto vegetal de alfalfa con achaparramiento; y además, cortes ultrafinos desde hojas de alfalfa infectadas con ADV. Las preparaciones fueron contrastadas con una solución de acetato de uranilo al 2% y observadas en un MET (JEOL JEM 1200 EX II). En las preparaciones dip se pudieron observar partículas desde cuasiesféricas a baciliformes todas con diámetros de unos 18 ηm, similares a las descriptas para el AMV; partículas isométricas de unos 30 ηm de diámetros y partículas alargadas de más de 200 ηm de longitud, semejantes a las que presentan miembros de las familias Luteoviridae y Rhabdoviridae, respectivamente. La observación de los preparados ISEM mostró únicamente partículas virales de unos 30 ηm de diámetro, similares a las de BLRV, las que se encontraban en escasa cantidad. En uno de los cortes ultrafinos se pudo observar una partícula viral con ~80 ηm de diámetro y ~420 ηm de largo, y morfología similar a la de los rhabdovirus, localizada en el citoplasma de una célula del floema, y no se observó ningún otro tipo de partículas de posible origen viral. Se lograron visualizar partículas virales similares a las del AMV, BLRV y ADV.
