Caracterización del sistema de endocannabinoides (anandamida/CB/FAAH) en placenta humana. Interacción con CGRP.

FARINA M, CELLA M, WOLFSON M, LEGUIZAMÓN G, SORDELLI M, BILLI S, RIBEIRO ML, FRANCHI AM.

Buenos Aires

Congreso; XXVI Congreso Internacional de Ginecología y Obstetricia - Buenos Aires, Argentina – 2008.; 2008

El sistema de endocannabinoides está constituido por ligandos, que mayoritariamente derivan del ácido araquidónico, y sus receptores específicos (CBs). Trabajos recientes han involucrado a los endocannabinoides en diversos procesos como la fertilización, el transporte oviductal, la implantación y el desarrollo de la placenta, sugiriendo que estarían regulando múltiples funciones reproductivas. La placenta es un órgano crítico para el crecimiento y desarrollo fetal, ya que es la responsable de transferir los nutrientes, iones y lípidos desde la madre al feto. Expresa varias substancias vasoactivas y neuropéptidos, que pueden tener un papel significativo en la regulación local del flujo sanguíneo placentario. Recientemente se ha demostrado que la anandamida (AEA), uno de los principales endocannabinoides, es capaz de regular la liberación neuronal del CGRP, uno de los más potentes vasodilatadores endógenos. Por ello, nuestro objetivo es caracterizar el sistema de endocannabinoides (AEA/CB/FAAH) en la placenta humana y determinar su participación en la regulación de CGRP. Materiales y Métodos: Mediante RT-PCR se analizó la presencia de los ARNm y por radioconversión la actividad de FAAH. Se detectaron CB1, CB2 y FAAH por western blot. Por inmunohistoquímica se examinó la localización de FAAH y CGRP en las vellosidades coriónicas. Los resultados obtenidos demuestran que el sistema de endocannabinoides se encuentra presente en placenta humana a término. Detectamos la expresión de CB1, CB2 y FAAH. Observamos que la FAAH se localiza en sincitiotrofoblasto y encontramos que las vellosidades coriónicas presentan actividad de FAAH. Adicionalmente detectamos inmunoreactividad positiva para CGRP en explantos de placenta humana. Para investigar el efecto de AEA sobre CGRP, explantos de vellosidades coriónicas provenientes de mujeres con embarazos sin complicaciones, luego de cesáreas electivas fueron incubados con distintas concentraciones de AEA y por diferentes tiempos. Los explantos se estabilizaron y posteriormente fueron incubados con medio RPMI 1640 o diferentes concentraciones de AEA a 37ºC en atmósfera de 5% de CO2. Paralelamente se realizaron ensayos de viabilidad tisular dado que el sincitiotrofoblasto es extremadamente sensible. La integridad del tejido se mantuvo por lo menos durante 48hs de cultivo. Observamos que en concentración nanomolar, y a tiempos cortos (30min), la AEA es capaz de modular CGRP en explantos de placenta humana.