Estudio de variabilidad de la región promotora del virus linfotropico T humano tipo I (HTLV-1) en individuos infectados de la ciudad de Buenos Aires.

EIRIN ME, DELFINO CM, BERINI CA, CAROBENE M, BIGLIONE MM

Buenos Aires

Congreso; X Congreso Argentino de Virología; 2011

Sociedad Argentina de Virología

INTRODUCCIÓN. El HTLV-1 es el agente etiológico de la Leucemia de Células T del Adulto (ATL) y de la Mielopatía asociada al               HTLV-1 o Paraparesia Espástica Tropical (HAM/TSP). En el mundo existen focos endémico, incluyendo el Noroeste argentino. Del 3 al 5% de los individuos infectados desarrollan HAM/TSP o ATL. TRE-1 y TRE-2 son elementos altamente conservados en el promotor viral LTR que interactúan con la proteína viral Tax, factor clave en la regulación de la transcripción y replicación proviral (Figura 1). Los TREs se componen de 3 repeticiones (distal, central y proximal) y ensayos de mutagénesis in vitro demostraron que mutaciones en dominios específicos de éstos modifican la actividad promotora del LTR con posibles implicancias en la patogénesis de la infección. Sin embargo, son escasos los estudios realizados en secuencias virales de pacientes con HAM/TSP y ATL. OBJETIVO. Estudiar la presencia de mutaciones nucleotídicas en los elementos TREs del promotor viral LTR, presentes en el provirus  detectado en pacientes con HAM/TSP,  ATL y portadores asintomáticos MATERIALES Y MÉTODOS. Se analizaron retrospectivamente 73 muestras HTLV-1+ de pacientes con ATL (n=3), HAM/TSP (n=16) y asintomáticos (n=54) residentes de Bs As. A partir de sangre entera se obtuvo ADN (Qiagen) y se amplificó por hemi-nested-PCR la secuencia completa del LTR proviral (754pb). Se realizó secuenciación directa, la edición (Sequencher) y el alineamiento de las secuencias incluyendo como prototipo el genoma ATK-1 (Bioedit). Luego, se identificaron las mutaciones en los TREs. RESULTADOS. Se detectaron 6 variantes en el TRE-1 (con distinta frecuencia) con mutaciones puntuales en cada caso (transiciones). Cuatro localizadas en una de las tres repeticiones (3 en la distal y 1 en la proximal) y 2 presentaron simultáneamente mutaciones en dos repeticiones (distal/central y distal/proximal) (Figura 2). Una de ellas, se halló en una zona rica en nucleótidos C/G, sitio de interacción directa con la proteína Tax. En el motivo TRE-2, se detectaron 3 variantes, una presentando dos transiciones A/G; otra una transición A/G y una deleción y la última una doble deleción. No se observó correlación entre patología y alguna variante en particular. CONCLUSIONES. Estos resultados evidenciaron la presencia de mutaciones en dominios genómicos altamente conservados en los HTLVs. La ausencia de correlación entre las mismas y el estado de infección o patología sugiere que otros factores virales o del huésped estarían involucrados en el desarrollo de la HAM/TSP y ATL. Estudios moleculares in vitro, implicando otras regiones genómicas y el factores del individuo como el HLA, podrían contribuir a dilucidar datos relevantes de la patogénesis de la infección.