LA AUSENCIA DE P53 MODIFICA LOS NIVELES DE HO-1 Y SOD2 EN CÉLULAS MADRE PLURIPOTENTES

TORO A; SOLARI C; WAISMAN A; PETRONE MV; VAZQUEZ ECHEGARAY C; FRANCIA M; COSENTINO S; NEW, ELIZABETH; VAZQUEZ ELBA; GUBERMAN A

Taller; IV Taller de Biología Celular y del Desarrollo; 2018

Las células madre embrionarias (CME) son células madre pluripotentes(CMP) y poseensus dos propiedades fundamentales: la auto-renovación y la pluripotencia. LasCMP se caracterizan por poseer bajos niveles de especies reactivas del oxígeno (ROS)ya que poseen exacerbado su mecanismo de defensa frente al estrés oxidativo quegarantiza la estabilidad genómica. Resultados previos de nuestro laboratorioindican que los niveles de Hemo oxigenasa-1 (HO-1) y superóxidodismutasa 2 (Sod2), dos proteínas que forman parte de dicha maquinaria dedefensa, varían durante la diferenciación. Si bien estas enzimas han sido ampliamente estudiadas, aún no se conoceen detalle su relevancia y regulación en el contexto de las CMP. Porotro lado, p53, además de su función como guardián del genoma, participa en laregulación del estado redox. Diversos trabajos han estudiado la relación entredichas proteínas antioxidantes y la vía de p53, sin embargo, poco se sabe sobresu relación en CME. En el presente trabajo nos planteamos como objetivoestudiar como influye p53 en el sistema de defensa antioxidante de CME. Paratal fin, utilizamos una línea p53-/- generada previamente en nuestrolaboratorio y estudiamos mediante RT-qPCR, Western blot (WB) y/oinmunofluorescencia (IF) la expresión de HO-1 y Sod2. Encontramos que losniveles proteicos de HO-1 y Sod2 son mayores en la línea p53-/- que en sucontraparte wild type (wt). Sin embargo, no encontramos diferencias ni en losniveles ni en la fosforilación de Nrf2. A su vez, dado que encontramosdiferencias en la respuesta celular al tratamiento con H2O2entre ambas líneas analizamos los niveles de ROS mediante citometría de flujocon diferentes sondas y encontramos un mayor nivel de ROS citoplásmaticos enlas CME p53-/-. Nuestros resultados sugieren que la expresión de los genesclave implicados en la maquinaria de defensa frente al estrés oxidativo está aumentadaen CME que carecen de p53 y dicha respuesta celular está dada por un mecanismoindependiente de Nrf2, sugiriendo un nuevo papel de p53 en la defensa contraROS en CME.