EFECTOS DE LA HIPOXIA EN LA GENERACIÓN DE CÉLULAS MADRE PLURIPOTENTES INDUCIDAS HUMANAS

QUESTA M; SOLARI C; LOSINO N; ROMORINI L; BLUGUERMANN C; FERNANDEZ ESPINOSA D; VIDELA RICHARDSON G; SEVLEVER G; GUBERMAN A; MIRIUKA S

Mar del Plata

Congreso; saic 2012; 2012

SAIC

Las células somáticas humanas pueden ser reprogramadas a Células Madre PluripotentesInducidas (CMPi), las cuales pueden, a su vez, diferenciarse a cualquier célula adulta. Estacaracterística es de gran interés en medicina regenerativa y en el estudio in vitro de enfermedadesgenéticas. Para su validez se requieren ciertos criterios como morfología de células pluripotentes,auto-renovación ilimitada, expresión de marcadores de pluripotencia, downregulación demarcadores de diferenciación, independencia de los factores utilizados para su reprogramación yconformidad con pruebas de diferenciación. Los objetivos del presente trabajo fueron lareprogramación de fibroblastos humanos a CMPi bajo condiciones de normoxia e hipoxia a fin decomparar eficiencias, caracterizar las líneas obtenidas y analizar su identidad pluripotente en lasdistintas condiciones. La reprogramación se realizó introduciendo Factores de Transcripciónembrionarios mediante un sistema lentiviral. Se establecieron las líneas de CMPi y se las validó,confirmándose características morfológicas y proliferativas de células pluripotentes, alta expresiónde marcadores de pluripotencia, capacidad de diferenciación a las tres capas germinales yformación de teratomas, confirmando pluripotencia in vitro e in vivo. Se comparó la eficiencia desu generación en hipoxia y normoxia y se evaluó la expresión de marcadores de pluripotencia yblancos de hipoxia en cultivo crónico o agudo al 5% de O2. Se encontró que la generación deCMPi en hipoxia es menos eficiente que en normoxia, pero no se encontraron diferencias depluripotencia entre las líneas generadas en normoxia y en hipoxia crónica. En cambio, seencontraron diferencias en la expresión de marcadores de pluripotencia durante el cultivo hipóxicoagudo, en contraste con normoxia. En conclusión, la expresión de marcadores de pluripotencia nose ve aumentada al cultivar CMPi en hipoxia crónica, pero podría estarlo en hipoxia aguda.http://congresos.pccp.com.ar/saic2012/IngresoDeAbstracts/admin2/utils/...