REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE REMODELADORES DE LA CROMATINA EN CÉLULAS MADRE EMBRIONARIAS Y CÉLULAS MADRE PLURIPOTENTES INDUCIDAS

LUZZANI C; SOLARI C; LOSINO N; BARAÑAO L; MIRIUKA S; GUBERMAN A

Congreso; SAIC 2010; 2010

Las Células Madre Embrionarias (CME) poseen la capacidadde proliferar indefinidamente in vitro, sin presentar cambios ensu fenotipo. A su vez, pueden ser diferenciadas a múltiples tiposcelulares de interés. Durante la diferenciación ocurren cambios enla organización de la cromatina a nivel global y de loci específicos.Por otra parte, en los últimos años se ha logrado reprogramarcélulas terminalmente diferenciadas, obteniéndose células conpropiedades similares a las CME. La obtención de estas células,llamadas Células Madre Pluripotentes Inducidas (CMPI), se vefavorecida al utilizar ácido valproico, un inhibidor de deacetilasasde histonas (HDACs) o cuando se sobrexpresan componentes decomplejos remodeladores de la cromatina. Nuestra hipótesis esque ciertos factores de transcripción específicos de CME, comoOct3/4, SOX2 y Nanog, podrían estar regulando la expresión degenes que codifican para ciertas enzimas modificadoras de lacromatina y que éstas, a su vez, podrían modular la expresión delos primeros. El objetivo de este trabajo es estudiar la participaciónde factores remodeladores de la comatina en el mantenimiento delestado indiferenciado, durante la diferenciación y en la generaciónde CMPI. Mediante RT-qPCR estudiamos la expresión génica dealgunas acetilasas de histonas, HDACs, metiltransferasas y demetilasasde histonas en CME en estado indiferenciado y durante sudiferenciación y en CMPI. Encontramos que el perfil de expresiónde los factores analizados en CMPI es similar al de CME y queéstos varían con la diferenciación, sugiriendo que la regulación dela expresión de estos factores es crítica. Por último, diseñamos unsistema lentiviral de silenciamiento génico de algunos de dichosremodeladores y probamos su efectividad en un sistema heterólogo.Este sistema servirá para estudiar la relevancia de dichosremodeladores en el mantenimiento del estado indiferenciado y enlos procesos de diferenciación y desdiferenciación celular.