Modulación de la expresión de factores modificadores de histonas en células madre embrionarias humanas.

LUZZANI, C.D; SCASSA M.E; ROMORINI, L.; LOSINO, N.I; SEVLEVER, G.; BARAÑAO L.; MIRIUKA S., GUBERMAN, A.S.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; SAIC 2009; 2009

SAIC

Las Células Madre Embrionarias (CME) poseen la capacidad de proliferar indefinidamente in vitro, sinpresentar cambios en su fenotipo. A su vez, pueden ser diferenciadas a células de cualquier linaje conexcepción de tejidos extraembrionarios. El balance entre estos dos destinos depende de una finaregulación de la expresión de genes específicos dirigida por señales externas a la célula. Existen, además,cambios en la organización de la cromatina a nivel global y de loci específicos. Por otra parte, los tejidosembrionarios se desarrollan en un ambiente hipóxico en las primeras etapas del desarrollo. Si bien aún noestá claro el efecto de la hipoxia sobre CME, se ha reportado que la exposición de las mismas a unatensión de oxígeno baja (de 1-3%) favorece el mantenimiento del estado indiferenciado. Nuestra hipótesises que ciertos factores de transcripción específicos de CME como Oct3/4, SOX2 y Nanog podrían estarregulando la expresión de genes que codifican para ciertas enzimas modificadoras de la cromatina y quedurante la diferenciación o en condiciones de bajas concentraciones de oxígeno, se modifica su perfil deexpresión. Mediante inmunofluorescencia y RT-PCR comprobamos el estado de diferenciación celular deCME humanas de la línea HUES-9. Posteriormente, por RT-PCR y RT-qPCR analizamos la expresión dediversos genes de enzimas modificadoras de la cromatina. Encontramos que en CME indiferenciadas seexpresan tanto enzimas con actividad acetilasa de histonas (Myst2, GTF3C3, GTF3C4 y Gcn5l2) comodeacetilasas (HDAC2, HDAC3 y HDAC5), metiltransferasas de histonas (SETDB1, Ehmt2, PRMT1, Suv39h1y Suv39h2) y un factor perteneciente al Complejo Represor Polycomb 1, Bmi-1. Nuestros resultadosmuestran que los perfiles de expresión de algunas de estas proteínas varían con la diferenciación y/o conla disponibilidad de oxígeno, sugiriendo que la regulación de la expresión de la maquinaria deremodelación de la cromatina es importante para estos procesos.