Cambios en la expresión de actina y E-cadherina inducidos por la Terapia Fotodin¨¢mica con ALA en c¨¦lulas tumorales y normales

DI VENOSA G., RODRIGUEZ L., MAMONE L., BATLLE A., CASAS A.

Buenos Aires, Argentina

Jornada; XXIV Jornadas de Oncología °Un enfoque multidiciplinario"; 2008

Instituto AH Roffo

La Terapia Fotodinámica (TFD) es un tratamiento antitumoral que se basa en la muerte celular luego de la aplicación de luz sobre células tumorales fotosensibilizadas. El ácido 5-aminolevúlico (ALA) se emplea como precursor de la Protoporfirina IX, que es un potente fotosensibilizador. Ha sido reportado que la TFD afecta la expresión de algunas proteínas de citoesqueleto como así también de otras involucradas en la adhesión celular. El objetivo de este trabajo es estudiar los cambios inducidos por la TFD con ALA sobre la expresión de actina y E-cadherina sobre una línea de mama normal y su contraparte transfectada con el oncogén H-Ras. Se emplearon la línea de epitelio mamario luminar normal HB4a, y su derivada HB4a-Ras, que es más resistente a la TFD que la parental. Luego de 1 h del tratamiento con ALA-TFD se observó un 15 % de células vivas HB4a y un 30 % de HB4a-Ras, por tinción con azul Tripán y a ese mismo tiempo de observaron microscópicamente grandes alteraciones en la morfología celular. En cambio por el ensayo de MTT  los valores más bajos de viabilidad se encuentran luego de 24 hs. Las células HB4a expresan un grueso anillo de actina cortical además de fibras de estrés ubicadas principalmente en la periferia celular, mientras que las células HB4a-Ras expresan actina en forma de agujas que protruyen desde la zona de actina cortical hacia el exterior, y además en forma de una fina malla en toda la célula. Luego de 24 hs de ALA-TFD, se vio en las HB4a sobrevivientes, una morfología similar a la de las HB4a-Ras, con reducción del anillo de actina cortical, mientras que en las HB4a el tratamiento indujo la formación de vesículas de actina superficiales. Por otra parte, la expresión de E-cadherina no sufrió cambios con el tratamiento. Los datos sugieren que en el presente modelo de células normales/tumorales, la TFD con ALA afecta el citoesqueleto de actina, independientemente de la resistencia al tratamiento, pero no afecta la adhesión célula-célula.