Evaluación del estado de oxido-reducción de los ovocitos porcinos vitrificados por sistema de mínimo volumen

SERGIO MORADO; AILÉN APARICIO; DANIELA PINCHETTI; PABLO CETICA

Medellín

Jornada; Encuentro de Investigadores de las Ciencias Pecuarias; 2017

Introducción: la vitrificación de ovocitos porcinos presenta resultados inferiores a los observados en otras especies. En nuestro laboratorio aplicando el sistema Cryotech® la gran mayoría de ellos recupera su morfología normal y mantiene su viabilidad luego del proceso de vitrificación-atemperado. Sin embargo, el sistema sigue siendo subóptimo posiblemente por fallas relacionadas a cambios en el estado redox de los ovocitos. Objetivo: evaluar el estado redox de ovocitos porcinos madurados in vitro que han sido vitrificados por el método Cryotech®. Métodos: complejos ovocito-cúmulus inmaduros se obtuvieron por aspiración de folículos ováricos antrales de hembras faenadas y aquellos rodeados por un cúmulus denso e íntegro fueron madurados en medio 199 con gentamicina, fluido folicular porcino, FSH y LH bajo aceite mineral a 39°C, 5% CO2 y 100% de humedad durante 48h. Los ovocitos fueron denudados y luego vitrificados por el método Cryotech®. Luego fueron atemperados (tiempo 0h) e incubados por 3 y 21h. Los controles fueron ovocitos no vitrificados evaluados a los mismos tiempos. El estatus oxidativo citosólico y las mitocondrias activas de los ovocitos se determinaron por la coloración fluorescente dual RedoxSensor Red CC-1/MitoTracker Green FM y la producción de especies reactivas del oxígeno (ROS) por DCHFDA. Resultados: tanto en los ovocitos frescos como en los vitrificados se observó un descenso de los tres parámetros estudiados a lo largo del tiempo (p