DETERMINACIÓN DE ESTADO REDOX CITOSÓLICO Y MITOCONDRIAL EN LA VITRIFICACIÓN DE MÍNIMO VOLUMEN DE OVOCITOS PORCINOS MEDIANTE AUTOFLUORESCENCIA NADH Y FAD

DANIELA PINCHETTI; AILÉN APARICIO; PABLO CETICA; GABRIEL DALVIT; SERGIO MORADO

Capital Federal

Jornada; Jornada de Jóvenes Investigadores; 2016

DETERMINACIÓN DE ESTADO REDOX CITOSÓLICO Y MITOCONDRIAL EN LA VITRIFICACIÓN DE MÍNIMO VOLUMEN DE OVOCITOS PORCINOS MEDIANTE AUTOFLUORESCENCIA NADH Y FADPINCHETTI D1, APARICIO A1, CETICA P1,2, DALVIT G1, MORADO S1.1Cátedra de Química Biológica, INITRA (UBA), 2INPA (UBA-CONICET), Facultad Cs. Veterinarias, UBA. Buenos Aires, Argentina.La vitrificación de ovocitos porcinos presenta aún resultados sub-óptimos debido, en parte, a su alto contenido citoplasmático de lípidos, al grosor de la zona pelúcida y a la composición de la membrana plasmática. El objetivo de este trabajo fue evaluar el estado redox mitocondrial y citosólico de ovocitos porcinos madurados in vitro y sometidos al proceso de vitrificación-atemperado. Los complejos ovocito-cúmulus fueron obtenidos por aspiración de folículos ováricos antrales, seleccionados bajo lupa estereoscópica y madurados en medio 199 con sulfato de gentamicina, fluido folicular porcino, FSH y LH, bajo aceite mineral a 39°C, 5% de CO2 en estufa de aire humidificado durante 48hs. Los ovocitos madurados fueron denudados y vitrificados por el método de mínimo volumen Cryotech. El estado redox de los ovocitos fue determinado por la autofluorescencia de FAD y NADH, utilizando filtros verde (excitación 473nm, emisión 490-590nm) y azul (excitación 405nm, emisión 420-520nm), respectivamente, mediante el análisis de microfotografías digitales. La autofluorescencia correspondiente a NADH fue mayor en ovocitos vitrificados que en ovocitos frescos (p