Alteración en la activación de NFkB en macrófagos peritoneales de ratones NOD.

LAROCCA L; CALAFAT M; ROCA V; FRANCHI A; PEREZ LEIROS C

Mar del Plata, BsAs

Congreso; 52a Reunion anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clinica

Los ratones diabéticos no obesos (NOD), desarrollan una respuesta Th1 espontánea con pérdida de la función secretoria a partir de las 12 semanas. Ésta sintomatología se asemeja al Síndrome de Sjögren (SS) en humanos. El VIP (péptido intestinal vasoactivo) es el  neuropéptido más abundante del sistema inmune y  por acción sobre macrófagos y linfocitos T polariza la respuesta hacia Th2. El factor nuclear kB (NF-kB) tiene un papel central en la respuesta inflamatoria y su activación se describe en varias enfermedades autoinmunes. Se han informado alteraciones en la activación y función de los macrófagos de ratones NOD. El objetivo de este trabajo consistió en estudiar la activación de NF-kB por lipopolisacárido (LPS) en macrófagos peritoneales de ratones NOD comparados con ratones controles BALB/c. Se emplearon hembras de 16 semanas. La producción de nitritos se determino por Griess, la expresión de IkB-alfa y p65 por western  blot (WB) e inmunofluorescencia indirecta (IFI). Por WB se observó la degradación de IkB- alfa en citosol de macrófagos peritoneales BALB/c tras estimularlos 15 min con 10 ug/ml LPS (unidades arbitrarias de área -UA: X ± ES; Basal 37 ± 3; LPS  14 ± 1 P<0.05) y dicha degradación fue simultánea a la translocación al núcleo de p65 observada por IFI. VIP (10-7M) revirtió la degradación de IkB-alfa (UA  X ± ES; LPS 14 ± 1; LPS-VIP 33 ± 3;  P<0.05). En contraste, en macrófagos peritoneales de  ratones NOD  no se observó degradación de IkB- alfa y p65 está translocado en condiciones basales. Estos resultados son consistentes con las determinaciones de nitritos en presencia y ausencia de sulfasalazina. Mientras en el BALB/c el inhibidor de NF-kB revierte totalmente la producción de nitritos, en los macrófagos de ratones NOD no se observa este efecto. Los resultados indican una alteración en la activación de NF-kB en los macrófagos de ratones NOD que influye en la producción de óxido nítrico.