Análogos estructurales del cristal violeta inhiben el transportador de prolina TcAAAP069 de Trypanosoma cruzi y presentan actividad tripanocida

SAYE, MELISA; VALERA-VERA, EDWARD; GAUNA, LUCRECIA; REIGADA, CHANTAL; MIRANDA, MARIANA; PEREIRA, CA

Resistencia, Chaco

Congreso; XXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología (SAP); 2018

Sociedad Argentina de Protozoología (SAP)

La enfermedad de Chagas, cuyo agente etiologico es el parasito protozoario Trypanosoma cruzi, es una zoonosisque afecta alrededor de 7 millones de personas en America Latina. El cristal violeta (CV) se utilizodurante muchos a~nos como aditivo en bancos de sangre para prevenir la transmision de la enfermedad portransfusiones sanguneas. Uno de los mecanismos de accion reportado para el CV en T. cruzi involucra lainhibicion de la captacion de prolina. Ademas de ser un aminoacido relevante dado que constituye una fuentede carbono y energa alternativa a la glucosa, en T. cruzi, la prolina tambien es importante no solo parael crecimiento sino tambien para la diferenciacion entre estadios y la patogenesis. La permeasa de prolinaTcAAAP069 pertenece a la familia de transportadores de aminoacidos y derivados TcAAAP, y constituyeno solo un interesante blanco terapeutico sino tambien una posible va de ingreso de farmacos tripanocidas.En este trabajo se utilizo el CV como molecula de referencia en un virtual screening para identicar farmacosaprobados para uso clnico estructuralmente parecidos al CV con efecto biologico similar y menor toxicidad.Primero se valido el CV como inhibidor del transportador TcAAAP069 utilizando parasitos salvajes yparasitos que sobre-expresan la permeasa TcAAAP069 tanto en ensayos de transporte como de crecimiento.Luego se aplico una estrategia in silico de virtual screening usando como referencia el CV y se identicaronla olanzapina (OLZ, antipsicotico), la clofazimina (CFZ, antibiotico), la loratadina y la ciproheptadina (LTDy CPH, ambos antihistamnicos). Las cuatro drogas inhibieron el transporte de prolina y presentaron IC50scon valores entre 9 y 120 M para los epimastigotes y entre 2 y 55 M para los tripomastigotes de la cepa Yde T. cruzi. Ademas, CFZ, LTD y CPH tuvieron accion tripanocida en epimastigotes de las cepas CL Brenery en DM28c con IC50s en rangos similares a la cepa Y. Por ultimo, se observo un efecto sinergico entre elbenznidazol y una mezcla de estos tres analogos del CV, evidenciado por los ndices de combinacion y dereduccion de dosis. En conclusion, estos resultados sugieren que los analogos del CV LTD, CPH y CFZ son interesantespuntos de partida para el desarrollo de tratamientos alternativos contra la enfermedad de Chagas.