INVESTIGADORES
RUGGIERO Melina
congresos y reuniones científicas
Título:
Diversidad de las plataformas genéticas portadoras de blaPER-2 en enterobacterias de Argentina
Autor/es:
M. RUGGIERO; F. BRUNETTI; L. DABÓS; J. DI CONZA; P. POWER; G. GUTKIND; T. NAAS
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; VIII Congreso SADEBAC 2018; 2018
Resumen:
PER-2 fue la segunda BLEE más prevalente en enterobacterias de Argentina, responsable del 5-10% de la resistencia a oxiimino-cefalosporinas en Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli. Esta enzima, a pesar de su elevada eficiencia hidrolítica sobre la mayoría de los β-lactámicos, se encuentra confinada a nuestra región y países limítrofes, hecho que resulta sumamente llamativo. Recientemente hemos publicado la secuencia completa de un plásmido IncA/C1 portador de blaPER-2, siendo este el único estudio sobre plataformas genéticas portadoras de dicho gen. Con el objetivo de esclarecer la baja diseminación y evaluar la diversidad de plataformas genéticas asociadas a blaPER-2, se secuenciaron plásmidos portadores del gen obtenidos de 12 aislamientos de enterobacterias provenientes de pacientes hospitalizados entre los años 1997-2012 de Buenos Aires y Santa Fe, y los entornos génicos inmediatos a blaPER-2 fueron comparados.El ADN plasmídico de cada cepa fue transformado en E. coli TOP10 y el ADN total de la cepas transformantes fue secuenciado mediante Illumina MiSeq. El ensamble se realizó con SPAdes previo filtrado de las lecturas de ADN cromosómico frente a un genoma de referencia. Los gaps fueron cerrados por PCRs, las notaciones se realizaron mediante RAST, la detección de los genes de resistencia mediante ResFinder, los grupos de incompatibilidad con PlasmidFinder y las comparaciones con MAUVE.El gen blaPER-2 se encontró codificado en plásmidos de grupos de incompatibilidad variados: IncN2 (4), IncA/C1 (1), IncA/C2 (2), IncA/C2-like (2) IncFIB(Mar)/ HI1B (3). Los plásmidos IncN2 fueron cerrados y comparados en su totalidad. Entre éstos se evidenció conservación del core. Los genes de resistencias a β-lactámicos, además de blaPER-2, detectados en el conjunto de plásmidos fueron: blaTEM-1, blaCTX-M-2, blaOXA-2, blaOXA-9, blaSCO-1. La estructura previamente reportada ?ISPa12-like/blaPER-2/gst-like/abct? se observó en todos los casos con la IS completa o parcial y flanqueando el entorno inmediato de esta estructura se evidenció la presencia de una o dos copias de la ISKox2-like. En varios plásmidos, dicho entorno se encontró próximo a un integrón de clase 1.Los resultados demuestran que blaPER-2 puede encontrarse asociado a distintos grupos de incompatibilidad de plásmidos, tanto aquellos que se detectan con frecuencia en enterobacterias (IncA/C2), como aquellos que no tienen una alta prevalencia (IncA/C1). Probablemente estos plásmidos pertenezcan a linajes no tan eficientes para su transmisión o sean plásmidos que aún no se han transferido a clones exitosos para su diseminación. Aun así, su persistencia en el tiempo indica que al menos pueden ser seleccionados por presión antibiótica y conservados. En todos los casos la asociación del entorno inmediato de blaPER-2 está relacionado con ISKox2-like, que sugiere sería responsable de su reclutamiento a partir de la fuente de origen, posiblemente en distintos eventos a diferentes tipos de plásmidos.