PRIMERA DETECCIÓN MOLECULAR DE Varroa Destructor Virus-1 (VDV-1) EN COLONIAS DE Apis mellifera DE LA PROVINCIA DE BUENOS AIRES, ARGENTINA

BRASESCO, C.; QUINTANA, S.; DI GERÓNIMO, V.; GENCHI GARCIA, M.L.; SGUAZZA, G.H.; BRAVI, M.E.; EGUARAS, M.; REYNALDI, F.J.; MAGGI, M.

Mar del Plata

Congreso; IV Congreso Argentino de Microbiología; 2018

Apis mellifera puede ser infectada por 24 tipos de virus en todo el mundo. La mayoría de estosvirus son ARN de polaridad positiva y pertenecen a las familias Dicistroviridae y Flaviviridae. Aligual que el virus de las alas deformes (DWV), Varroa destructor Virus-1 (VDV-1) es vectorizadopor el ácaro ectoparásito Varroa destructor aumentando su prevalencia y virulencia en las coloniasde abejas. VDV-1 se relaciona estrechamente con DWV, existiendo eventos de recombinaciónentre ambos. El objetivo de este estudio fue detectar, mediante ensayos de RT-PCR en tiemporeal, la presencia de VDV-1 en abejas adultas de colonias de la provincia de Buenos Aires. Seextrajo el ARN total de pooles de 10 abejas adultas, de diferentes colonias de 24 colmenares en 22localidades de la provincia. Se digirió con DNasa y luego se realizaron reacciones de RT-PCR entiempo real para detectar la presencia de VDV-1 con cebadores específicos, que generan unproducto de amplificación de 204pb, de la región de la poliproteína estructural del genoma del virus.Para confirmar la detección se utilizó un segundo par de cebadores que amplifican 660 pb de laproteína helicasa del virus VDV-1. Todos los ensayos de PCR en tiempo real se llevaron a cabocon Evagreen como intercalante fluorescente. Como control interno para verificar la correctaextracción de ARN y la ausencia de inhibidores para evitar falsos negativos se realizó unaamplificación del gen de β-actina de A. mellifera. Luego de las amplificaciones, los productos dePCR de VDV-1 fueron purificados y secuenciados para verificar que los mismos correspondieran ala secuencia de VDV-1 analizándolos mediante el software Blast. Los alineamientos mássignificativos se produjeron con secuencias reportadas del genoma completo del virus detectado enácaros de los Países Bajos. De las 24 muestras analizadas, 21 (83%) fueron positivas para VDV-1siendo este el primer reporte de detección de este virus en Argentina, en donde se observa que elmismo se encuentra en altas prevalencias en colonias de A. mellifera de la Provincia de BuenosAires. Futuros estudios permitirán determinar el impacto de este virus per se, su capacidad derecombinación con el DWV en los colmenares de nuestro país, así como comparar el efectopatógeno de estos recombinantes con DWV y VDV-1.