DETECCIÓN DE VIRUS DE ABEJAS MELÍFERAS EN ABEJAS SIN AGUIJÓN (HYMENOPTERA: APIDAE) DE LA PROVINCIA DE MISIONES, ARGENTINA

GENCHI GARCIA, M.L.; BRAVI, M.E.; ALVAREZ, L.J.; FUENTEALBA, N.A.; REYNALDI, F.J.; RAMELLO, P.J.; SGUAZZA, G.H.; GALOSI, C.M.; LUCIA, M.

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología, V Simposio de Virología Clínica, III Simposio de Virología Veterinaria; 2017

Asociación Argentina de Microbiología

Las abejas silvestres (Hymenoptera, Apiformes), representa uno de losgrupos de insectos más importantes por su papel vital en la polinizaciónde las plantas, tanto silvestres como cultivadas. Desde hace varios añosexiste a nivel mundial una gran preocupación por la disminuciónpoblacional y en algunos casos extinciones regionales de estos insectosdebido a múltiples razones, entre las que se destaca la presencia dedistintas clases de virus hallados principalmente en la abeja de la miel(Apis mellifera L.). Las abejas sin aguijón (Apidae: Meliponini) son ungrupo de abejas sociales de distribución pantropical, que en Argentinaestán representadas por 37 especies, encontrándose su mayor riquezaen la provincia de Misiones. El objetivo de este trabajo fue detectar lapresencia de virus, ya encontrados en Apis mellifera, en abejas sinaguijón. Se tomaron 73 muestras de 11 localidades de la provincia deMisiones. Una parte de las muestras se usó para la identificacióntaxonómica y otra parte fue transportada y refrigerada. En el laboratoriose conservaron a -80°C para asegurar la preservación del ARN viral. Cadamuestra (10 individuos), fue macerada con 1 ml de PBS y centrifugada a15000g por 15 min. El ARN total fue extraído utilizando un kit comercial(Viral Nucleic Acid Extraction Kit II - Real Biotech) y diluido en 50µl deagua libre de nucleasas. Se realizó una RT- PCR múltiple que permite laidentificación de 7 virus. El protocolo consiste en una desnaturalizacióninicial de 5 min a 95°C, seguido de 40 ciclos de [30 seg a 95ºC, 30 seg a53ºC, 60 seg a 72ºC] y una extensión final de 5 min a 72°C. El productoamplificado fue analizado por electroforesis en gel de agarosa al 2%. Lasmuestras positivas fueron purificadas utilizando el kit Wizard® SVGel&PCRClean Up (Promega) y posteriormente secuenciadas. Lassecuencias fueron analizadas con el software BLAST. En cuatro especiesde Meliponinas y en Apis mellifera se detectó la presencia de 3 virus:ABPV (virus de la parálisis aguda), (DWV tipo A) virus de las alasdeformadas y IAPV (virus israelí de la parálisis aguda).Epizootiológicamente es importante determinar si estos virus sonpatógenos propios de Apis mellifera que han sido transmitidos ameliponinas o son naturalmente patógenos de estas últimas.