Efecto de LPS y células apoptóticas sobre macrófagos peritoneales de ratones NOD prediabéticos: modulación por VIP

LAROCCA L; CALAFAT M; ROCA; RAMHORST R; PEREZ LEIROS C

La Falda, Cordoba

Congreso; 56 Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

SAI

Los ratones diabéticos no obesos (NOD) constituyen un modelo adecuado de la sintomatología sicca semejante al Síndrome de Sjögren en humanos. A partir de las 12 semanas (estado prediabético) muestran una pérdida progresiva de la función secretoria y una respuesta Th1 espontánea contra las glándulas exócrinas. El VIP (péptido intestinal vasoactivo) es el  neuropéptido más abundante del sistema inmune y  por acción sobre macrófagos y linfocitos T polariza la respuesta hacia Th2. Previamente informamos que los macrófagos peritoneales de ratones NOD presentan una mayor producción de nitritos y citoquinas Th1 frente a un estimulo inflamatorio como el LPS. El objetivo de este trabajo consistió en estudiar la respuesta de los macrófagos peritoneales de ratones NOD y controles BALB/c frente a un estimulo inflamatorio (LPS) y a células apoptóticas y el efecto de VIP en ambos casos. Se emplearon hembras de 16 semanas. Se incubaron macrófagos peritoneales con LPS (10 ug/ml) o se realizaron co-cultivos con timocitos a los cuales previamente se les indujo apoptosis con dexametasona (10-6 M). La activación de NFkB en macrófagos se evaluó por microscopía confocal y western blot, IL-10 por ELISA, la fagocitosis por tinción de hematoxilina eosina y la producción de nitritos por Griess. Se observó que los ratones NOD presentan translocación basal de NFkB y menor porcentaje de fagocitosis (X ± ES; BALB/c: 31.6 ± 0.8; NOD: 26.1 ± 1.1; P<0.05). El VIP inhibió este efecto en ambas cepas. Asimismo, a diferencia de los macrófagos BALB/c, en los macrófagos de NOD el LPS no indujo la producción de IL-10. En el co-cultivo con timocitos apoptóticos los niveles de nitritos aumentaron respecto del BALB/c, VIP disminuyó la producción de óxido nítrico solo en NOD (X ±ES; BALB/c: 6.2 ± 1.1; NOD: 26 ± 1.9; P<0.01; NOD: 26 ± 1.9, NOD+VIP: 16 ± 0.9; P<0.05). Los resultados indican una activación alterada de los macrófagos NOD en el estado prediabético comparados con los BALB/c, con activación basal de NFkB, mayor producción de NO y menor de IL-10 ante un estímulo inflamatorio como el LPS; y menor porcentaje de fagocitosis y mayor producción de NO frente a células apoptóticas. El VIP inhibió a los macrófagos ante ambos estímulos.