La expresión génica de HO-1 no está restringida epigeneticamente y requiere factores de transcripción relacionados a estrés en plantas de soja sometidas a radiación ultravioleta-B

SANTA- CRUZ DM; PACIENZA N; ZILLI CG; PAGANO, EDUARDO; BALESTRASSE KB; YANNARELLI GG

Congreso; XI Reunión del Grupo Español de Investigación en Radicales Libres (GEIRLI); 2016

p { margin-bottom: 0.25cm; direction: ltr; color: rgb(0, 0, 10); line-height: 120%; text-align: left; }p.western { font-family: "Calibri",serif; font-size: 11pt; }p.cjk { font-family: "Calibri"; font-size: 11pt; }p.ctl { font-family: "Calibri"; font-size: 11pt; }a:link { color: rgb(0, 0, 255); }Laenzima Hemooxigenasa-1 (HO-1) juega un rol protector frente al estrésoxidativo en plantas. Sin embargo, los mecanismos que regulan suexpresión génica han sido poco estudiados. En el presente trabajoinvestigamos el estado de metilación de una región rica en CG delpromotor de HO-1 y la expresión de factores de transcripción (TFs)en plantas de soja sometidas a estrés por radiación ultravioleta-B(UV-B). El ADN genómico y el ARN total fue aislado de hojas deplantas irradiadas con 7.5 y 15 kJ.m-2 UV-B. El ADN fue tratado conbisulfito de sodio y una región promotora de 304 pares de bases fueamplificada mediante PCR, clonada en un vector plasmídico pGEM-T yanalizada por secuenciación de ADN. El análisis de la secuenciaciónmostró niveles de metilación del promotor de HO-1 similares enplantas control y tratadas con las diferentes dosis de UV-B (C:3.0±0.6%; 7.5: 3.14±0.5%; 15: 2.9±0.5%). Es interesante notar queel promotor de HO-1 se encontró fuertemente demetilado en el grupocontrol. Posteriormente, se estudió mediante RT-PCR cuantitativa laexpresión génica de un grupo de TFs relacionados a estrés porcalor, sequía y salinidad pero no habían sido estudiados frente aestrés por radiación UV-B (GmMYB177, GmMYBJ6, GmWRKY21 y GmWRK13).Se observó que los tres primeros responden a estrés por UV-B ymediarían la sobre-expresión de HO-1. En conjunto, estos resultadosdemuestran que la HO-1 no estaría regulada de una maneraepigenética. Más aun, los bajos niveles de metilación del promotorsugieren que esta enzima puede responder rápidamente a fin de paliarel estrés ambiental. Finalmente, este trabajo permitió identificaralgunos TFs involucrados en la sobre-expresión de HO-1 en respuestaa la radiación UV-B.