Caracterización de cepas nativas de Bacillus thuringiensis altamente tóxicas para Cydia pomonella (Lepidoptera: Tortricidae)

ONCO, M.; SAUKA, D.; PÉREZ, M.; BENINTENDE, G.

Mar del Plata

Congreso; IV Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental y I Jornada de Microbiología General; 2018

Asociacion Argentina de Microbiologia

El manejo de Cydia pomonella, plaga principal de frutales depepita, se basa en el uso de insecticidas químicos con los riesgos ambientalesque acarrean. Por esto, tecnologías a base de Bacillus thuringiensis constituyen una alternativa eficaz y segura por su toxicidad selectiva alta eimpacto casi nulo que generan en los ecosistemas. La característica principal de esta bacteria es que produce cuerpos cristalinos constituidos por proteínas Cry/Cyt durante la esporulación, tóxicos para larvas de insectos. Puede secretar otros factores de virulencia durante la fase vegetativa de crecimiento, que le confieren capacidad de multiplicarse en el huésped y producir septicemia. El objetivo de este trabajo fue caracterizar fenotípica y genotípicamente cepas nativas de B. thuringiensis con alta toxicidad para larvas neonatas de C. pomonella. Se emplearon 5 cepas nativas de B. thuringiensis (INTA H12-5, INTA Mo1-7, INTA 54-8, INTA L93-3, e INTA H42-1)pertenecientes al cepario IMYZA-INTA, seleccionadas a partir de un estudio detamizaje previo. Se identificaron en ellas cristales bipiramidales y cúbicos bajo microscopio de contraste de fases. Se observaron bandas de ca. 130 y 65kDa mediante SDS-PAGE, asociadas a la morfología de cristales y consistentes con la presencia de genes cry1 y cry2 detectados a través de PCR. Por la misma metodología se descartó la presencia del gen thuE, sugiriendo que no producirían b-exotoxina. Todas mostraron perfiles electroforéticos de REP-PCR idénticos y perfiles plasmídicos similares a los de la cepa serovar kurstaki HD-1. Aparecieron diferencias cuando se analizaron los perfiles de genes de toxinas insecticidas obtenidos. INTA L93-3 e INTA Mo1-7 por un lado, e INTA54-8 e INTA H12-5 por otro, presentaron perfiles similares que se diferenciaron por la ausencia de cry1Ab en el último grupo. INTA H42-1 presentó un perfil génico atípico no descripto previamente (cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac y cry2Aa). Finalmente se cuantificó la virulencia estimando valores de CL50. INTA H12-5(CL50=1,2 ug de biomasa/ml dieta) resultó ser la más tóxica. No existieron diferencias significativas entre los valores obtenidos para todas las cepas. Por lo expuesto, INTA H12-5 podría considerarse como ingrediente activo de un formulado de alta toxicidad para C. pomonella de aplicación regional. Otra cepa a tener en cuenta sería INTA H42-1, debido a una toxicidad similar a la de HD-1 y a las variaciones en su perfil génico de toxinas insecticidas.