Desarrollo de nuevas formulaciones de adyuvantes basados en cajas lipídicas

GIULIANA LUPI; CAROLINA ROLDÁN; LIHUE GONZALEZ; ESTEFANÍA PROCHETTO; IVÁN BONTEMPI; VERÓNICA GONZÁLEZ; GABRIEL CABRERA; IVÁN MARCIPAR

Buenos aires

Taller; Vacunología 2018, Tercera Edición; 2018

Subcomisión de vacunologia. Asociación argentina de microbiología

Previamente hemos desarrollado el adyuvante ISPA basado en cajas lipídicas que permite no solo potenciar la respuesta humoral en diferentes especies de animales, sino también orientar a un perfil de respuesta inmune balanceado humoral-celular. En este trabajo nos planteamos complementar dichas cajas lipídicas con diferentes componentes para potenciar aún más la respuesta inmune y el perfil de memoria a largo plazo.Utilizamos ovoalbúmina (OVA) como antígeno modelo que fue formulada con el adyuvante ISPA o alternativamente cuatro formulaciones diferentes correspondientes a las mismas cajas lipídicas pero complementadas con tres compuestos. Analizamos el desempeño de las distintas formulaciones (denominadas ISPA-OVA, ISPA-A1-OVA, ISPA-A2-OVA, ISPA-B-OVA o ISPA-C-OVA) inmunizando ratones BALB/c (n=5/grupo). Se realizaron tres inoculaciones, una cada catorce días, obteniéndose muestras de sangre a los 15, 30, 45, 75 y 165 días luego de la primera inoculación (dlpi). Sobre cada muestra se determinaron los niveles de IgG1 e IgG2a específicas anti-OVA mediante ELISA. En los días 45, 75 y 165 se realizaron ensayos de hipersensibilidad retardada (DTH). Luego del día 169 obtuvimos esplenocitos, los cultivamos en presencia de OVA durante 72h, y los marcamos con anti-CD4, anti-CD44 y anti-CD62L para evaluarlos por citometría.Todas las formulaciones probadas desarrollaron altos niveles de IgG1 e IgG2a específicas y notablemente los niveles se conservaron luego de 4 meses de terminado el plan de inmunización. Pudo evidenciarse en todos los grupos una alta respuesta DTH que no disminuyó con el tiempo y que 75 dlpi fue mayor para ISPA-A2-OVA e ISPA-C-OVA con respecto a ISPA-OVA (p