Expresión de citoquinas en células mononucleares de sangre periférica de terneras inmunizadas con Neospora caninum antes de alcanzar la pubertad

HECKER Y.P. ; REGIDOR-CERRILLO J.; HORCAJO P.; GUAL I.; TORIONI S.; FIORANI F.; PEREYRA S.; ORTEGA-MORA L.M.; ECHAIDE I.; CANTÓN G.; MOORE D.P.

Buenos Aires

Jornada; X Jornadas y Reunión Anual de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria (AAIV); 2017

Neospora caninum es un protozoo intracelular obligado, causante de abortos y graves pérdidas económicas en la industria ganadera mundial, lo que justifica la necesidad de avanzar en la comprensión de los mecanismos inmunes que brindan protección contra la enfermedad. Aunque se han realizado numerosas investigaciones en el desarrollo de inmunógenos para su control, son varios los interrogantes que aún se plantean. Se ha hipotetizado que la inoculación de una cepa viva de N. caninum en terneras prepúberes genera respuesta inmunitaria sin provocar infección crónica en el animal. El objetivo de este trabajo fue evaluar la expresión génica de citoquinas en terneras inoculadas con taquizoítos vivos de N. caninum antes de alcanzar la pubertad. Se utilizaron 48 terneras Aberdeen Angus seronegativas a N. caninum de entre 6 y 8 meses de edad libres de otras enfermedades reproductivas. Las hembras fueron asignadas al azar en 2 grupos: Grupo A (n = 24): animales inoculados por vía subcutánea (SC) con una dosis de 1×106 taquizoítos vivos de la cepa NC-Argentina LP1 en 3 ml de solución fisiológica estéril (SFE); Grupo B (n = 24): animales inoculados con placebo (SFE). Se extrajeron muestras de sangre para el aislamiento de células mononucleares de sangre periférica (CMSP) los días 0, 11, 15 y 21 post inoculación (PI). Todas las hembras inmunizadas incrementaron sus niveles de IgG total a partir del día 21 PI (Hecker et al. 2016, AAVLD 2016). El ARN se extrajo de las CMSP utilizando TRIzol® reagent de acuerdo a las instrucciones del fabricante (ThermoFisher Sci., CA, EEUU). Se evaluó la expresión de citoquinas (IFN-γ, IL-4, IL-10, IL-12 y TNF-α) mediante transcripción reversa y PCR en tiempo real y se determinó el ratio IgG1/IgG2 mediante un ELISA in house. En el Grupo A se observó un aumento significativo en la expresión de IL-12 a partir del día 11 PI (P