Requerimientos de actividades Tirosina Quinasas y Fosfatasa en la exocitosis de espermatozoides humanos. (Requiriment of tyrosine kinase and phosphatase activities in human sperm exocytosis)

ROGGERO, CARLOS M.; TOMES, CLAUDIA N.; DE BLAS, GERARDO A.; SALING, P. M.; MAYORGA, LUIS S.

La Serena, Chile

Congreso; XIV Reunion Annual, Sociedad Chilena de Reproduccion y Desarrollo.; 2003

El acrosoma es un gránulo que cubre la parte anterior del núcleo del espermatozoide maduro. En respuesta a un estímulo fisiológico o farmacológico, este sufre un tipo especial de exocitosis regulada por calcio llamada reacción acrosomal, la cual es un prerequisito para la fertilización. La fosforilación en tirosina es un mecanismo por el cual se regulan múltiples eventos celulares. Aquí reportamos que calcio induce la fosforilación en tirosina en espermatozoides humanos permeabilizados con Streptolisina-O de una manera bifásica, una antes y otra después de la liberación del calcio intracrosomal. Como esperamos, el pretratamiento con tyrphostin A47-un inhibidor de tirosina quinasas-suprime el efecto del calcio. Llamativamente el incremento inducido por calcio en la fosforilación en tirosina tiene un correlato funcional en la exocitosis de espermatozoides.El bloqueo de los grupos fosfotirosina con un anticuerpo específico previene la reacción acrosomal disparada por calcio y Rab3A. Además la inhibición de tirosina quinasas con genisteína, tyrphostin A47 y tyrphostin A51, y de tirosina fosfatasas con pervanadato; bis(N,N-Dimethylhydroxoamido) hydroxovanadato; 3,4-Dephostatin-Ethyl y phenylarsine óxido previenen la reacción acrosomal.Secuestrando reversiblemente calcio intracrosomal con un quelante fotosensible, mostramos que la fosforilación en tirosina, como también tirosina quinasas, son requeridas en una etapa tardía de la vía exocítica, después del eflujo de calcio intracrosomal. Tanto espermatozoides humanos como de ratón contienen tirosina fosfatasas sensibles a pervanadato altamente activas.