Identificación de una droga tripanocida mediante el empleo de estrategias combinadas de ?virtual screening?

REIGADA, CHANTAL; VALERA-VERA, EDWARD; AVILA, CARLA; SAYE, MELISA; MIRANDA, MARIANA; PEREIRA, CA

CABA

Simposio; XVIII Simposio Internacional Sobre Enfermedades Desatendidas de la Fundación ?Mundo Sano?.; 2017

Fundación Mundo Sano

Las poliaminas, putrescina, espermidina y espermina sonmetabolitos esenciales para el funcionamiento celular ycrecimiento del parásito Trypanosoma cruzi. En tripanosomátidos,son precursoras en la biosíntesis de tripanotión,fundamental para el equilibrio redox. Dado que T.cruzi es incapaz de sintetizar las poliaminas de novo, sudisponibilidad intracelular depende exclusivamente deltransporte. Por lo tanto, el transporte y el metabolismode poliaminas son interesantes blancos terapéuticos contrala enfermedad de Chagas. Con el objetivo de identificardrogas que inhiban el transporte de poliaminas seusó la permeasa de estos compuestos de T. cruzi, denominadaTcPAT12, como blanco para el reposicionamientode drogas mediante el empleo de técnicas in silico e invitro. En primer lugar se realizó una búsqueda por similitudutilizando una base de datos de 3000 drogas aprobadaspor la FDA y el acetato de retinol como compuesto dereferencia. Este compuesto, según reportes previos, enLeishmania spp. produce la disminución intracelular depoliaminas. Con las drogas obtenidas en la primera etapay un modelo tridimensional del transportador TcPAT12se realizó un análisis de ?molecular docking?. Finalmente,se realizaron ensayos in vitro con epimastigotes y célulasinfectadas con tripomastigotes de T. cruzi. Con la primeratécnica de ?virtual screening? basado en similitud seobtuvieron siete retinoides, los cuales fueron utilizadospara la segunda técnica de ?molecular docking?. Finalmentese seleccionó la isotretinoína, una droga usadapara el tratamiento de acné, para realizar los ensayos invitro. Se demostró que este retinoide inhibió el transportede poliaminas y aminoácidos; se obtuvieron valoresde IC50 entre 5 ? 10 μM para poliaminas, lisina, prolinay una mezcla de 15 aminoácidos. La isotretinoína mostróun efecto tripanocida fuerte sobre la eclosión de tripomastigotesen células infectadas tratadas con esta drogacon una IC50 de 130 nM y un índice de selectividad cercade 920. Se propusieron autofagia y apoptosis comomecanismos de muerte del parásito inducidos por la droga.Estos resultados demuestran que la isotretinoína, uncompuesto aprobado por la FDA, inhibe el transporte demetabolitos esenciales de T. cruzi y resultó ser 25 vecesmás efectiva que las drogas nifurtimox y benznidazol.Por lo tanto, la isotretinoína es una droga prometedorapara el tratamiento de la enfermedad de Chagas.