Apoptosis En Células De Granulosa De Ovario Bovino De Línea Establecida (BGC-1)

CAROU, MC.; CRUZANS, PR.; FIORITO, CD.; REVILLA, M.; LOMBARDO, DM.

Esperanza, Santa Fé

Jornada; XII Jornada de Divulgación Técnica – Científica, FCV – UNR y la Jornada Nacional de Divulgación Técnico Científica 2011, FCV – UNL.; 2011

Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional de Rosario y Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional del Litoral

Numerosos trabajos demostraron presencia de receptores de GnRH en células de granulosa (CG) de ovarios de distintas especies y su relación con la función gonadal mediante la inducción de apoptosis “in vitro” e “in vivo” con distintos agonistas de GnRH. En nuestro laboratorio hemos observado que, mediante análisis morfológico con tinción con Hematoxilina y por el análisis por citometría de flujo con Anexina V y Ioduro de Propídio, la incubación de un agonista de la GnRH, el Leuprolide (LA) a una concentración de 100 nM incubado por 24 Hs indujo apoptosis en la línea celular establecida de células de granulosa bovina (BGC-1) cultivada en presencia de SFB al 5%, y que la pre incubación por 3 Hs con un antagonista competitivo de la GnRH, el Antide, a 100 nM, inhibe parcialmente la apoptosis inducida por esta concentración de LA. Al analizar los resultados por TUNEL e ICQ para BAX nuevamente se evidencio un aumento significativo de la apoptosis inducida con LA 100 nM. También, en esta misma línea celular, se determinó un aumento en la actividad de caspasas 3 para el tratamiento con LA 100 nM con 24 y 48 hs de incubación, evidenciándose además que, la pre incubación con ANT 100 nM, inhibe parcialmente la actividad de caspasas inducida por el LA 100 nM. Considerando los resultados previos obtenidos en BGC-1, se procedió a analizar las vías intracelulares de regulación. Con este objetivo, se analizó la expresión de proteínas de la familia Bcl-2 (Bax y Bcl-2; vía intrínseca), mediante western blot (WB) y actividad de Fosfolipasa D (PLD; vía extrínseca).