Variabilidad en la secuencia del gen P5CS en porotos andinos y mesoamericanos

SALIM E; FEKETE A; GALVÁN M

Salta

Congreso; XLII Congreso Argentino de Genética; 2013

Sociedad Argentina de Genética

La expresión del gen P5CS en poroto (Phaseolus vulgaris L.) es inducida significativamente por la salinidad y la sequía. El gen P5CS codifica para la enzima delta1-pirrolina-5-carboxilato sintetasa (P5CS) que está involucrada en la síntesis de prolina a partir de glutamato. En el presente trabajo se analizó la variabilidad existente en parte de la secuencia del gen P5CS en 15 variedades y líneas de poroto común evaluadas por su tolerancia a estrés hídrico. La extracción de ADN se realizó a partir de plántulas empleando un protocolo de CTAB modificado. Con el ADN extraído se realizó la amplificación parcial del gen P5CS mediante PCR utilizando los primers P1 y P2. Los fragmentos amplificados se separaron por electroforesis en geles de agarosa 1,5 % teñidos con GelRedTM. Se realizó la purificación de los productos de PCR para su posterior secuenciación. Los fragmentos secuenciados se analizaron utilizando el programa BioEdit y se compararon con secuencias disponibles en la base de datos del National Center for Biotechnology Information (NCBI). A partir del análisis de las secuencias se agrupó a los aislamientos en andinos y mesoamericanos identificando las variaciones (SNPs, Indels) presentes en las mismas. El conocimiento de la variabilidad presente en esta secuencia es de gran utilidad en la evaluación de los pooles génicos del germoplasma de poroto y como base para futuros estudios de expresión génica.