INVESTIGADORES
DÍAZ Gabriela VerÓnica
congresos y reuniones científicas
Título:
DISEÑO DE CEBADORES PARA UN GEN RESPONSABLE DE LA ACTIVIDAD BIOCONTROLADORA DE Beauveria sp.
Autor/es:
GA BICH; ML CASTRILLO; GV DÍAZ; EL RECALDE; MG MEDVEDEFF
Lugar:
Salta, Capital
Reunión:
Congreso; XLI Congreso Argentino de Genética. III Reunión Regional SAG-NOA; 2013
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Genética - Universidad Nacional de Salta
Resumen:
El hongo entomopatógeno Beauveria es un patógeno natural de insectos y ha sido empleado y desarrollado como agente activo en insecticidas microbianos contra numerosas plagas importantes en agricultura. La virulencia fúngica está mayormente relacionada hacia los primeros pasos de la infección que involucra la acción de enzimas degradadoras de cutícula. Numerosos estudios están dirigidos a lograr cepas fúngicas modificadas biotecnológicamente que produzcan una sobreexpresión de factores de virulencia. Una de las enzimas encargadas de la degradación de la cutícula de los insectos son las proteasas tipo subtilisina Pr1. Estas enzimas son importantes para la degradación de la cutícula de insectos y crecimiento saprofítico del hongo. El objetivo del presente estudio fue diseñar iniciadores para la amplificación del gen de proteasas tipo subtilisina Pr1 para Beauveria sp. para ello se seleccionaron secuencias aminoacídicas del banco de datos del NCBI y se alinearon empleando la herramienta ClustalW del software Mega 5.2. En base a los patrones de alineamiento logrados se identificaron solo 2 regiones conservadas y se usaron para el diseño de los iniciadores. La eficiencia de estos iniciadores fue probada virtualmente empleando FastPCR para verificar sus cualidades, como el contenido de G-C, temperatura de hibridación (Tm) o formación de homo o heterodímeros, obteniéndose los cebadores sentido y antisentido con características dentro de las esperadas. Finalmente estos cebadores restan por ser evaluados empíricamente en el laboratorio.