Efecto del sulfuro de hidrógeno sobre la terapia fotodinámica inducida por ácido 5-aminolevulinico en células de adenocarcinoma mamario murino.

CALVO, GUSTAVO; DI VENOSA, GABRIELA; VALLECORSA, PABLO; MAMONE, LEANDRO; ORLANDO, CRISTIAN GABRIEL; BATLLE, ALCIRA; CASAS, ADRIANA; SAENZ, DANIEL

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; 16° Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas de la Universidad de Buenos Aires.; 2016

Hospital de Clínicas de la Universidad de Buenos Aires y Universidad de Buenos Aires

Objetivos: La terapia fotodinámica(TFD) es un tratamiento para inducir daño en un tejido después de laadministración de un fármaco fotosensibilizante activado (FS). Luego de suirradiación con luz visible en presencia de oxígeno se generan especies reactivasdel oxigeno (ROS) citotóxicas. El ácido 5-aminolevulínico (ALA) es el precursordel FS protoporfirina IX, y la ALA-TFD es una de las técnicas de TFD más ampliamenteempleadas.El sulfuro dehidrógeno (H2S) ha sido reconocido como un gas biológicamente activo, contribuyendo a muchos procesos fisiológicos y patológicos. Junto con elóxido nítrico (NO) y el monóxido de carbono son denominados transmisores gaseosos. Estostransmisores gaseosos atraviesan libremente las membranas, se generan de formaendógena enzimáticamente y tienen funciones definidas a concentracionesfisiológicas.El objetivo de este trabajofue estudiar el impacto de H2S en la respuesta del ALA-TFD. Materiales y Métodos: Empleamos dos líneascelulares de adenocarcinoma mamario murino, LM3 y LM2 -fueron provistas por elInstituto de Oncología Ángel H. Roffo-. La línea LM3 produce NO mientras que la LM2 no produce NO. Ambas líneasproducen H2S endógenamente.La incubación de las célulascon NaHS, dador de H2S, no es tóxico en el intervalo deconcentración empleado (0,05-10 mM). Las condiciones de la ALA-TFD fueron: 3 hexposición a ALA 1 mMy  e iluminación con diferentes dosis deluz.Se determinó por espectrofluorometríalos niveles de porfirinal totales y utilizando una sonda específica, laproducción de oxígeno singulete.y por espectrofotometría, los niveles de NO,H2S y los niveles de oxidantes totales. Resultados: La incubación de las células con NaHS, dador deH2S, no es tóxico en el intervalo de concentración empleado (0,05-10 mM).La exposición de las células LM2a concentraciones crecientes de NaHS superiores a 0,5 mM, inhibió gradualmentela muerte celular inducida por la ALA-TFD y suprimió completamente el efecto de la TFD a partir de 1 mM de NaHS. En las célulasLM3, la exposición previa a NaHS no modificó la respuesta a la TFD. La síntesis de NO en la líneaLM3 es inhibida por H2S y o su precursor.Las células LM2 producen menosH2S a partir de cisteína que las LM3 (LM2:121+/-18 vs LM3: 239+/-26 nmolesH2S/106cel, *:p<0.05). El perfil de la acción de losinhibidores de la síntesis de H2S, es diferente, para ambas líneas celulares. Laconcentración de porfirinas totales sintetizadas a partir de ALA 1 mM, disminuyó en una curvadosis respuesta, en presencia de NaHS, solo en la línea LM2 (Control: 23+/-2,5;0.1 mM: 21,5+/-2,3; 1 mM: 15,9+/-2,0*; 10 mM: 9,9+/-1,8* ng porfirinas/105cel,*:p<0.05).Además, el NaHS inhibe laproducción de ROS in vitro producidosdespués de la iluminación de un FS. Conclusiones: Estos resultados sugieren que los niveles deNO y H2S podrían estar involucrados en la diferente sensibilidad a la TFD en ambas líneas de adenocarcinomamamario murino.