Estudio de cuatro nuevas porfirinas meso-sustituidas en Terapia Fotodinámica en Cáncer

VALLECORSA, PABLO; DI VENOSA, GABRIELA; MAMONE, LEANDRO; CALVO, GUSTAVO; ORLANDO, CRISTIAN GABRIEL; ARRAYGADA, CARLA; DANIEL SAENZ; BATLLE, ALCIRA; CASAS, ADRIANA

Ciudad de buenos Aires

Jornada; XXXI Jornadas Multidisciplinarias de Oncología ?Trabajo en equipo: la clave del éxito?.; 2016

Instituto de Oncología ?Ángel H. Roffo? y Ministerio de Salud de la Nación,

La TerapiaFotodinámica (TFD) involucra la administración de un fotosensibilizante (F) yla subsiguiente irradiación con luz visible, la cual promueve especies altamentereactivas del oxígeno, que reaccionan con una variedad de biomoléculasderivando en la muerte celular. En el presente trabajo, cuatro nuevos derivadosde porfirinas meso-sustituidas fueron testeados como potenciales Fs en la líneatumoral LM3 de adenocarcinoma mamario murino. Se usaron la 5,10,15,20-tetrakis[4-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)fenil] porfirina (TAPP), la 5,15-di(4-[3-N,N-dimetilaminopropoxi]fenil)-10,20-di(4-trifluoromethil feenil) porfirina (A2B2), la5,10,15,20-tetrakis[3-(N-etil-N-metilcarbazoil)] clorina (TEMCC) y su porfirinaanáloga (TEMCP). Los Ps mostraron la típica banda de Soret a ~420 nm y las cuatrobandas Q entre 515 y 650 nm. Una menos intensa banda a 650 nm se obtuvo paraTEMCC comparado con TEMCP. Estos compuestos también producen oxígeno singuletecon campos cuánticos de 0.40-0.53 en Dimetilsulfóxido. La toxicidad celularoscura luego de ser expuestas a los compuestos durante 3 horas determinó laconcentración máxima de trabajo, estas fueron de 2.5 mM paraTAPP y A2B2; y de 5 mM para TEMCC y TEMCP. Paratestear su eficacia como Fs, las celulas LM3 fueron expuestas a cada compuesto,empleando las concentraciones de trabajo mencionadas, durante 3 horas y luegoirradiadas con un banco de tubos fluorescentes (tasa de fluencia de 0.5 mW/cm2).La dosis letal 50 (DL50) obtenida para cada porfirina a 5uM fue la siguiente:TAPP: 135 mJ/cm2, TEMCC: 360 mJ/cm2, TEMCP: 420 mJ/cm2,A2B2: 600 mJ/cm2, mostrando que TAPP es el derivado más fotoactivo. Porello, se escogió esta porfirina para realizar la caracterización de losmecanismos de fototoxicidad. Estudios de uptakesugieren que TAPP es principalmente transportado por difusión pasiva. Estudiosde colocalización fueron realizados utilizando sondas fluorescentes específicasde organelas (LysoTracker Green para lisosomas, Mito Tracker Green para mitocondriay NBD C6-Ceramide para Aparato de  Golgi). Mediante microscopía deepifluorescecia y confocal hemos podido determinar que TAPP se localizaprincipalmente en las proximidades de las mitocondrias.