NUEVA FUNCIÓN A NIVEL CITOPLASMÁTICO DE HP (HETEROCROMATIN PROTEIN)1γ, PROTEÍNA HASTA EL PRESENTE SÓLO DESCRIPTA EN EL NÚCLEO, Y SU ROL DURANTE LA MIOGÉNESIS

CHARÓ N.; SUSPERREGUY S.; TONEATTO J.; PIWIEN-PILIPUK G.

Congreso; LVIII Reunión científica anual. Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2013

HP1γ es una proteína nuclear no histónica que participa en el control de la transcripción a través de su interacción con la RNA polimerasa II y en la organización de la compactación de cromatina, entre otras funciones. Ello nos condujo a estudiar su distribución subnuclear así como a los factores que con ella interactúan durante procesos de diferenciación tales como el miogénico. Empleando inmunofluorescencia indirecta y microscopía confocal llamativamente observamos que, HP1γ se localiza no sólo en el núcleo sino también en el citoplasma de mioblastos murinos C2C12. Luego de 4 días de inducida su diferenciación, HP1γ sigue localizada en el citoplasma adoptando un patrón filamentoso que colocaliza parcialmente con actina y β-tubulina, demostrándose mediante ensayos de inmunoprecipitación que ambas proteínas interactúan con HP1γ. En cambio, HP1α, otro miembro de la familia de las HP1 altamente homóloga, se encuentra presente exclusivamente en el núcleo tanto en mioblastos como en miotubos. Análisis por Western blot (WB) de las fracciones nucleares y citoplasmáticas de mioblastos y miotubos demuestra que HP1γ se encuentra en ambas fracciones mientras HP1α es sólo nuclear. En miofibrillas aisladas de músculo estriado de ratón, observamos que HP1γ se localiza en las bandas I colocalizando parcialmente con actina. Fraccionamiento núcleo-citoplasmático de músculo estriado, cardíaco y liso de ratón evidencian, por análisis de WB, en todos los casos una banda mayoritaria de HP1γ en la fracción citoplasmática. Para investigar la importancia funcional de HP1γ durante el proceso de miogénesis, se generaron mioblastos C2C12 en los que se interfirió la expresión de HP1γ de manera estable empleando shRNA. Las C2C12 HP1γ-/- no se diferenciaron. En síntesis, HP1γ no es una proteína exclusivamente nuclear, es necesaria para la diferenciación de los mioblastos y postulamos un nuevo rol para la misma en la formación/estabilidad y/o contractilidad de la fibra muscular esquelética.