Cambios dinámicos en la localización subcelular de heterochromatin protein (HP) 1 gama durante la diferenciación celular y el estrés térmico

CHARÓ N.,PIWIEN PILIPUK G

Congreso; LV Reunión científica anual. Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2010

En estudios recientes demostramos que en preadipocitos 3T3-L1 HP1γ se localiza tanto en regiones nucleares eucromáticas como heterocromáticas pero al inducir la adipogénesis HP1γ se concentra transitoriamente en el polo del núcleo opuesto al MTOC. La polarización nuclear de HP1γ requiere de su fosforilación en Ser83 dependiente de la activación de PKA. Nos preguntamos entonces si la redistribución nuclear de HP1γ ocurría en otros procesos de diferenciación celular, como por ejemplo la miogénesis, o en respuesta al estrés. Empleando inmunofluorescencia indirecta (IFI) y microscopía confocal observamos que en mioblastos C2C12, HP1γ se localiza en regiones nucleares eucromáticas y heterocromáticas. Llamativamente luego de 4 días de inducida la miogénesis, HP1γ se localiza no sólo en los núcleos sino también en el citoplasma de los miotubos donde colocaliza parcialmente con fibras de actina teñidas con faloidina. Análisis por Western blot (WB) de las fracciones nucleares y citoplasmáticas demuestran que en los miotubos HP1γ se detecta tanto en la fracción nuclear como en la citoplasmática. La inducción de la diferenciación de los mioblastos se acompaña de un aumento en la fosforilación de HP1γ en Ser83, y dicha forma fosforilada de HP1γ se detecta por IFI sólo en el núcleo. Por otra parte, durante el estrés térmico HP1γ se distribuye en el núcleo en foci donde colocaliza con la RNApol II fosforilada en Ser 2. Además el WB demuestra que HP1γ se fosforila entre los 15- 30 min de inducido el estrés térmico. En síntesis, HP1γ experimenta rápidos cambios en su distribución subnuclear dependiendo del tipo celular y del estímulo que reciba la célula. Nuestros resultados sugieren que HP1γ no sólo se localiza en el núcleo sino que trasloca a citoplasma en los miotubos y nos encontramos avocados a dilucidar el rol que HP1γ cumpliría en dicho compartimiento celular.