El desempeño de diferentes métodos de PCR en el diagnóstico de leishmaniasis tegumentaria Americana

CAJAL SP; ALMAZÁN C; GIL JF; MARCO JD; HOYOS CL; CARO N; BRACAMONTE ME; NASSER JR; UNCOS AD; JUAREZ M; MOYA ÁLVAREZ A; KROLEWIECKI AJ

Santa Fe

Otro; XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias - SIMPOSIO Internacional de Biología Celular y Molecular de la Enfermedad de Chagas; 2016

Sociedad Argentina de Protozoología

La leishmaniasis tegumentaria (LT) es una enfermedad parasitaria endémica en norte de la provincia de Salta, causada principalmente por Leishmania (Viannia) braziliensis. El diagnóstico se realiza por identificación de amastigotes enfrotis de lesiones teñidos con Giemsa, características clínicas de las lesiones, datos epidemiológicos y la Intradermo reacción de Montenegro. El objetivo de este trabajo fue evaluar el desempeño diagnóstico de 2 PCR que amplifican fragmentos de 700 (PCR1) y 120 pb (PCR2) de ADN de kinetoplasto (ADNk) deLeishmania sp., sobre hisopados de borde de lesiones. La extracción de ADN parcialmente purificado se realizó mediante sucesivos lavados con buffer de lisis y posterior incubación con proteinasa K, de acuerdo al método descripto por Higuchi (1989). Se utilizó una dilución 1/10 como templado para la amplificación. Se calculó valores de sensibilidad (S), especificidad (E) y valores predictivos negativos (VPN) y positivos (VPP) de cada PCR con relación a la presencia o ausencia de enfermedad de acuerdo a la combinación de resultados de los distintos métodos utilizados para diagnóstico. El grado de concordancia entre los métodos utilizados fue determinado mediante el Índice kappa de Cohen. Se procesaron 68 muestras de pacientes con lesiones en los que se requirió el diagnostico diferencial de leishmaniasis entre Diciembre de 2013 y Julio de 2015. El 88% corresponden a sexo masculino y 18% a sexo femenino, la mediana de edad fue de 42 años. Los valores de S, E, VPP y VPN para PCR1 fueron de 44,2%, 92%, 90,5% y 48,9% y para PCR2 de 79%, 100%, 100% y 72% respectivamente. El valor de coeficiente de Kappa calculado teniendo en cuenta los resultados defrotis, IDRM y de las 2 PCR fue de 0,53 (p