Respostas de hepatocitos do peixe zebra (Danio rerio, Cyprinidae) frente a co-exposição de benzo[a]pireno e o nanocompuesto de carbono fulereno (C60)”

LONNÉ, M.N.; SOARES CHAVES, I.; JOSENCLER RIBAS FERREIRA; DE LA TORRE, F.R; EDUARDO ALVES DE ALMEIDA; CARLOS EDUARDO FOSSA; MONSERRAT, J.M

Santa María, Rio Grande do Sul, Brasil.

Workshop; IV Workshop em Nanociências; 2009

&amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;lt;!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:"Cambria Math"; panose-1:2 4 5 3 5 4 6 3 2 4; mso-font-charset:1; mso-generic-font-family:roman; mso-font-format:other; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:0 0 0 0 0 0;} @font-face {font-family:Tahoma; panose-1:2 11 6 4 3 5 4 4 2 4; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:swiss; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:-520082689 -1073717157 41 0 66047 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-unhide:no; mso-style-qformat:yes; mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman","serif"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-ansi-language:ES; mso-fareast-language:ES;} .MsoChpDefault {mso-style-type:export-only; mso-default-props:yes; font-size:10.0pt; mso-ansi-font-size:10.0pt; mso-bidi-font-size:10.0pt;} @page WordSection1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.WordSection1 {page:WordSection1;} --&amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;gt;&amp;amp;amp;amp;nbsp; &amp;lt;!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:"Cambria Math"; panose-1:2 4 5 3 5 4 6 3 2 4; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:roman; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:-1610611985 1107304683 0 0 159 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-unhide:no; mso-style-qformat:yes; mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman","serif"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-ansi-language:PT-BR; mso-fareast-language:PT-BR;} .MsoChpDefault {mso-style-type:export-only; mso-default-props:yes; font-size:10.0pt; mso-ansi-font-size:10.0pt; mso-bidi-font-size:10.0pt;} @page WordSection1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.WordSection1 {page:WordSection1;} --&amp;gt; A elevada relação superficie/volume dos nanocompostos possibilita sua grande capacidade de absorção, gerando um risco potencial de eles agirem como carregadores de moléculas tóxicas, possibilitando sua incorporação celular. Neste trabalho foi avaliada a interação entre um composto aromático, benzo[a]pireno (BaP) e o nanocomposto fulereno (C60). As partículas de fulereno (nC60) foram obtidas após agitação de 200 mg de C60 prístino em 1 L de água Milli Q durante dois meses. A seguir, a suspensão foi centrifugada a 25.000 x g durante 1 h e filtrada através de uma membrana de nylon de 0,20 µm de tamanho de poro. Os hepatócitos foram mantidos a 28 oC em meio RPMI 1640 com 10% de soro fetal bovino. A funcionalidade mitocondrial (FM), medida pela redução do MTT foi utilizada como medida de viabilidade celular. Previamente foram avaliadas as condições de exposição das células, em termos de FM e dos valores de concentração de espécies reativas de oxigênio (EAO), medidas pela emissão de fluorescência do substrato H2DCF-DA. Os resultados obtidos mostraram que os valores de EAO intracelular no grupo controle aumentavam após 24 e 48 h de permanecerem em placas de cultura quando comparados com valores observados nos hepatócitos mantidos apenas 4 h na placas. Este resultado foi coincidente com uma queda ao longo do tempo da relação glutationa reduzida à oxidada. Assim, o tempo de 4 h foi escolhido para aumentar a sensibilidade na detecção de variações de EAO dos grupos tratados em relação ao grupo controle. Nos hepatócitos expostos ao BaP, as concentrações de 0,01; 0,1 e 1,0 µg BaP/L não alteraram a viabilidade em relação ao grupo controle, o que sim foi verificado para as concentrações de 10,0 e 100,0µg BaP/L (p<0,05). Como a concentração de 1 mg C60/L não alterou a viabilidade celular (p>0.05), foi avaliado o efeito do BaP (faixa de concentrações: 0,01-1,0 µg BaP/L) co-administrado com fulereno. Após 4 h, foi determinada a FM e EAO. Os resultados obtidos mostraram que a co-exposição dos hepatócitos à 1,0 µg BaP/L e 1 mg C60/L provocaram uma diminuição significativa na concentração de EAO (p<0,05) quando comparados com os expostos unicamente à 1,0 µg/L de BaP. Este resultado não pode ser interpretado como um efeito antioxidante porque simultaneamente foi observado uma menor capacidade redutora do MTT nas três concentrações de BaP quando co-administrados com C60. Possíveis efeitos per se do BaP e o C60 na FM foram excluídos ao incubar estes compostos com MTT sem os hepatócitos. Se conclui que, pelo fato das mitocôndrias constituírem a principal fonte intracelular de EAO, a queda destas espécies reativas de oxigênio junto com a menor FM indica que a exposição simultânea ao BaP e C60 induz alterações na funcionalidade mitocondrial.