INVESTIGADORES
MIRIUKA Santiago Gabriel
congresos y reuniones científicas
Título:
ROL DE LA METILTRANSFERASA PRMT8 EN CÉLULAS MADRE PLURIPOTENTES
Autor/es:
CARLOS LUZZANI; CLAUDIA SOLARI; ARIEL WAISMAN; NOELIA LOSINO; GUSTAVO SEVLEVER; LINO BARAÑAO; SANTIAGO G. MIRIUKA; ALEJANDRA S. GUBERMAN
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVIII Cogreso de SAIC; 2013
Institución organizadora:
SAIC
Resumen:
Las células madre embrionarias (ESCs) son células
derivadas del macizo celular interno (ICM) del blasto-
cisto. Poseen la capacidad de auto-renovarse indefini-
damente en cultivo y de dar origen a células de las tres
capas germinales, propiedad conocida como pluripoten-
cia. En un trabajo anterior buscamos enzimas remodela-
doras de la cromatina que fueran moduladas durante el
proceso de diferenciación de ESC. Esta búsqueda arrojó
una serie de genes candidato que podrían tener un rol
en el mantenimiento de las propiedades básicas de las
ESCs. En este trabajo estudiamos la relevancia de uno
de estos genes, la metiltransferasa Prmt8. Utilizando
un protocolo de diferenciación in vitro, comprobamos
que Prmt8 se regula negativamente durante el proceso
de diferenciación. Por otra parte, construimos una línea
estable de mESCs que contiene en su genoma un
shRNA inducible contra Prmt8. Probamos que al inducir
este shRNA los niveles de mensajero de esta enzima
disminuyen, y que esta disminución, en un principio, no
afecta la capacidad de auto-renovación de las células.
Mediante análisis de inmunofluorescencia estudiamos
la presencia y localización de marcadores del estado
indiferenciado. No encontramos diferencias sustan-
ciales en los marcadores analizados al comparar las
células cultivadas en presencia del inductor del shRNA
con las células control. Por otro lado, diferenciamos la
línea que sub-expresa Prmt8 y encontramos que los
cuerpos embrioides evolucionan de manera diferente
al control. Además, la pérdida de Prmt8 parece afectar
el ciclo celular de ESCs, disminuyendo el número de
células en fase S. Por último, utilizando un sistema
heterólogo, analizamos si la expresión exógena de los
factores de transcripción de pluripotencia modula la
expresión de Prmt8. En conjunto los datos sugieren que
Prmt8 es regulado positivamente por los estos factores
de transcripción y modulado durante la diferenciación,
hecho que podría ser clave en la determinación del tipo
celular de destino.