Regulación de la expresión de genes involucrados en el sistema de defensa frente a estrés oxidativo en células madre embrionarias y en células madre pluripotentes inducidas

CLAUDIA SOLARI; CARLOS LUZZANI; ARIEL WAISMAN; NOELIA LOSINO; LEONARDO ROMORINI; SANTIAGO G. MIRIUKA; LINO BARAÑAO; ALEJANDRA S. GUBERMAN

Mar del Plata

Congreso; LVII Congeso de SAIC; 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clinica

Las células madre (CM) embrionarias (CME) y las CM pluripotentes inducidas (CMPI) poseen un conjunto de mecanismos que aseguran la estabilidad genómica, evitando la propagación de daños genéticos. Uno de éstos involucra un complejo sistema de defensa contra el estrés oxidativo, compuesto por una serie de proteínas que actúan de manera coordinada manteniendo bajos niveles de especies reactivas de oxígeno. Se sabe que la actividad antioxidante disminuye a lo largo de la diferenciación. Sin embargo, no se conocen los mecanismos de regulación de la expresión de muchos de los genes involucrados. Nuestra hipótesis es que algunos de ellos serían regulados por los factores de transcripción (FT) propios de CM pluripotentes, Oct4, Sox2 y Nanog. En este trabajo seleccionamos genes del sistema de defensa ante el estrés oxidativo y analizamos in silico sus regiones promotoras en busca de secuencias consenso de unión de dichos FT. Mediante RT-PCR en tiempo real, estudiamos el perfil de expresión de los genes elegidos, en CME y en CMPI, tanto en estado indiferenciado como durante la diferenciación. Encontramos que el perfil de expresión coincide en muchos casos al comparar CME de ratón y humanas y, notablemente, en CME de ratón con CMPI de la misma especie. A partir de estos resultados seleccionamos un subgrupo de genes de acuerdo a su modulación. Actualmente, nos encontramos estudiando el efecto de la sobreexpresión de estos FT sobre los genes endógenos en sistemas heterólogos y la interacción de los mismos con los promotores de los genes seleccionados, mediante ChIP. El estudio de esta regulación contribuirá a la comprensión de los mecanismos que poseen las CM para mantener la integridad de su genoma. Entendemos que estos conocimientos nos acercarán a la posibilidad de disponer en un futuro de terapias basadas en estas células, lo cual depende en gran medida de su habilidad para mantener el genoma intacto y de poder dirigir su diferenciación a los tipos celulares requeridos.